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1、??窠浂舅?seaanemoneneurotoxin)是由46-49個氨基酸殘基組成的多肽,具有三個分子內二硫鍵。研究表明,它們能特異的結合興奮性細胞的鈉通道受體位點3,阻斷或減緩鈉通道的失活,延長細胞的動作電位時程。而且對不同組織的鈉通道以及不同鈉通道亞型作用有差異。許多??窠浂舅啬芘c心臟,神經和骨骼肌的鈉離子通道特異性地結合,因而它們能作為研究鈉通道的工具藥來使用。值得注意的是,許多抗癲癇的藥物(antiepilepticdru
2、gs,AEDs)是鈉通道的阻斷劑,有的藥物是作用于鈉通道失活過程從而達到治療的效果。鑒于??窠浂舅氐乃幱脙r值和開發(fā)前景,本論文初步探討了重組海葵神經毒素對大鼠大腦皮層神經元鈉通道的作用機制。 三種重組??窠浂舅?,即HK2a、HK7a和HK16a,具有47個氨基酸殘基,來源于側花???Anthopleurinsp.)。利用生物信息學分析軟件對三種新的??窠浂舅氐陌被嵝蛄羞M行分析,發(fā)現與前人報道的??窠浂舅谹p-C和Af
3、Ⅰ的同源性高,達95%。另外,三種??窠浂舅刂g也是高度同源的,只在三個氨基酸位點存在突變,它們是14、22和25位氨基酸。 本論文利用腦片膜片鉗的方法研究了三種重組??窠浂舅兀碒K2a、HK7a和HK16a,對SD大鼠大腦皮層神經元鈉通道的影響。研究發(fā)現,三種重組??窠浂舅囟寄芤种拼笫蟠竽X皮層神經元鈉電流,而不改變鈉通道最大激活電位。就它們與鈉通道的結合速度而言,HK7a最快,HK2a較慢,HK16a最慢。就抑制程度
4、而言,HK7a最強,HK16a和HK2a其次。 另一方面,HK7a既能增加鈉通道的延遲時間,又能降低鈉通道的最大激活電流峰值和延遲斜率;而HK2a和HK16a不改變鈉通道的延遲時間,對鈉通道最大激活電流峰值和延遲斜率有影響。 以上結果表明,HK7a延遲鈉通道失活的過程,是大鼠大腦皮層神經元鈉通道失活態(tài)阻滯劑。HK2a和HK16a不影響鈉通道失活,可能作用于鈉通道激活過程,是大鼠大腦皮層神經元鈉通道的阻滯劑。鑒于它們對
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