脫氧雪腐鐮刀菌烯醇對體外培養(yǎng)人胃癌細(xì)胞SGC-7901、BGC-823凋亡的影響.pdf

1、目的：惡性腫瘤的治療是醫(yī)學(xué)界研究的熱點(diǎn)和前沿領(lǐng)域，隨著科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展，腫瘤治療也取得了較大的進(jìn)展，新的治療藥物、方法不斷問世，一些毒性物質(zhì)已經(jīng)成功應(yīng)用于臨床腫瘤的治療，三氧化二砷便是最典型的例子。脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol，DON)又名致嘔毒素，是一種單端孢霉烯族毒素，為雪腐鐮刀菌烯醇的脫氧衍生物，主要由某些鐮刀菌產(chǎn)生。研究報道，DON具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性，對于原核細(xì)胞、真核細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞均具有明顯的毒性作用，但

2、是，DON的致癌性、致突變性尚沒有統(tǒng)一結(jié)論。目前，對于DON的研究多集中在檢測方法、免疫毒理學(xué)以及對正常細(xì)胞的影響方面，而關(guān)于DON對腫瘤細(xì)胞影響的研究國內(nèi)外均報道甚少。為探討DON對腫瘤細(xì)胞的可能影響，本研究觀察了DON對體外培養(yǎng)人胃腺癌細(xì)胞株SGC-7901(高分化)、BGC-823(低分化)細(xì)胞的影響，以期揭示DON對腫瘤細(xì)胞生長、凋亡的作用及其機(jī)理，為臨床腫瘤治療的可能應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。 方法：1.細(xì)胞培養(yǎng)用含10％胎牛血清

3、，105U/L青霉素，100mg/L鏈霉素的RPMI-1640培養(yǎng)基在37℃，5％CO2條件下體外培養(yǎng)SGC-7901、BGC-823細(xì)胞，細(xì)胞貼壁生長。選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞(傳代后24h)隨機(jī)分為對照組和處理組，對照組加入等體積的生理鹽水，處理組分別給予100、500、1000μg/LDON處理72h，常規(guī)消化、離心收集細(xì)胞。 2.MTT50、100、200、500、800、1000、1500、2000μg/LDON分別作用1

4、2h、24h、48h、72h后，檢測DON對細(xì)胞生長的影響，選擇DON對細(xì)胞的處理濃度和處理時間。 3.流式細(xì)胞定量檢測技術(shù)(FCM)檢測不同濃度DON處理對細(xì)胞凋亡的影響。 4.超微結(jié)構(gòu)觀察：應(yīng)用透射電鏡觀察細(xì)胞凋亡超微結(jié)構(gòu)的改變。 5.流式細(xì)胞定量檢測技術(shù)(FCM)、免疫細(xì)胞化學(xué)和蛋白免疫印跡(WesternBlotting)檢測不同濃度DON處理對SGC-7901、BGC-823細(xì)胞中Bax、Bcl-2蛋白

5、表達(dá)的變化。 結(jié)論：1.DON處理可以促進(jìn)體外培養(yǎng)SGC-7901、BGC-823細(xì)胞凋亡。 2.DON處理可以促進(jìn)體外培養(yǎng)SGC-7901、BGC-823細(xì)胞Bax在蛋白水平上表達(dá)的增高，并可使Bcl-2蛋白表達(dá)下降。 3.本研究結(jié)果提示，DON處理可促進(jìn)體外培養(yǎng)胃腺癌細(xì)胞SGC-7901(高分化)、BGC-823(低分化)發(fā)生凋亡，其可能機(jī)制為：上調(diào)Bax蛋白的表達(dá)，下調(diào)Bcl-2蛋白的表達(dá)，從而促進(jìn)細(xì)胞凋亡