抑制胰島移植物TF的表達(dá)對(duì)體內(nèi)IBMIR動(dòng)物模型影響的急性研究.pdf

1、目的:
　　 在臨床胰島移植中,注入門(mén)靜脈的胰島與血液接觸,立即發(fā)生一種凝血/炎癥反應(yīng)過(guò)程,我們稱(chēng)之為立即經(jīng)血液介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)(IBMIR),IBMIR是胰島植入后的最早損傷,將導(dǎo)致絕大多數(shù)移植物的丟失和功能損傷,是造成胰島移植早期細(xì)胞損傷最重要的原因,而胰島細(xì)胞表面的組織因子(tissue factor,TF)是激發(fā)IBMIR凝血反應(yīng)的始動(dòng)因子。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)反義RNA技術(shù),干擾組織因子(TF)在豬胰島細(xì)胞的表達(dá),對(duì)胰島進(jìn)行預(yù)處理

2、,并建立體內(nèi)IBMIR模型,觀察抑制TF表達(dá)后的胰島細(xì)胞對(duì)移植后IBMIR發(fā)生程度的影響。
　　 方法:
　　 采用反義RNA技術(shù),運(yùn)用實(shí)時(shí)定量RT-PCR方法篩選出對(duì)TF沉默效果最佳反義RNA,轉(zhuǎn)染新生豬胰島細(xì)胞。建立豬胰島細(xì)胞經(jīng)門(mén)靜脈移植于SCID小鼠的異種IBMIR體內(nèi)模型,將沉默TF表達(dá)后的新生豬胰島細(xì)胞在IBMIR體內(nèi)模型中各項(xiàng)指標(biāo)(血糖、C肽、TAT)進(jìn)行檢測(cè),并取肝臟組織作病理學(xué)檢測(cè),從而觀察IBMIR發(fā)生

3、程度。
　　 結(jié)果:
　　 經(jīng)RT-PCR方法檢測(cè)oligoTF-1006對(duì)胰島細(xì)胞TF沉默效果最佳,其抑制效果在轉(zhuǎn)染后第四天最好。將沉默TF表達(dá)后的豬胰島細(xì)胞經(jīng)門(mén)靜脈移植于SCID小鼠后,其1小時(shí)內(nèi)血糖降低程度、C肽值變化、血清TAT值及胰島細(xì)胞周?chē)ㄐ纬删@示其IBMIR的發(fā)生程度較對(duì)照組、空白轉(zhuǎn)染組明顯減輕。
　　 結(jié)論:
　　 TF作為IBMIR的啟動(dòng)因子,反義RNA能顯著抑制胰島細(xì)胞中TF的表