Ghrelin在糖尿病小鼠攝食調(diào)節(jié)與能量平衡中的作用.pdf

1、內(nèi)源性Ghrelin在STZ誘導的糖尿病小鼠多食中的作用 Ghrelin由胃底部粘膜細胞合成并分泌，啟動進食并促進食欲的重要調(diào)節(jié)因子。本實驗目的是：采用鏈脲菌素(STZ)誘導糖尿病小鼠，用Ghrelin受體拈抗劑，研究內(nèi)源性Ghrelin參與糖尿病多食調(diào)節(jié)的機理。 方法：1、24只NMRI小鼠分為兩組，每組12只，其中一組給予STZ誘導成為糖尿病小鼠模型，給予生理鹽水或Ghrelin受體拈抗劑(D-Lys3-GHRP-6

2、)，比較組間的血漿Ghrelin，血糖，腴高血糖素水平，攝食，體重和脂肪墊的變化。2、用免疫熒光組化技術(shù)檢測下丘腦Ghrelin，NPY，α-MSH和Orexin等神經(jīng)肽免疫活性細胞，用激光共聚焦技術(shù)分析下丘腦各神經(jīng)肽核團攝食肽和厭食肽免疫活性的表達。3、放射免疫實驗檢測胰高血糖素及Ghrelin在血清中的含量。實驗結(jié)果顯示：1、STZ糖尿病小鼠比正常對照組小鼠的血漿Ghrelin水平顯著升高。2、糖尿病小鼠的24小時(p＜0.05)及

3、2小時(p＜0.01)攝食增加，給予Ghrelin受體阻斷劑治療，可以23％降低24h和54％降低2h的攝食量，且能夠降低(33％)糖尿病小鼠的血糖。3、糖尿病小鼠NPY免疫陽性神經(jīng)元在下丘腦弓狀核的表達增加了2.4倍(p＜0.001)，而α-MSH免疫陽性神經(jīng)元降低了1.7倍(p＜0.05)，D-Lys3-GHRP-6可以使NPY及α-MSH的表達恢復正常。4、糖尿病組小鼠血漿Ghrelin水平顯著高于正常對照組(p＜0.05)(糖尿

4、病組：1266±200pg/ml；正常對照組：576±108pg/ml;)，Ghrelin受體阻斷劑使正常組Ghrelin水平(升至1240±246pg/ml)及糖尿病組血漿Ghrelin水平(升至1570±373pg/m1)皆有升高(p＜0.05)。糖尿病小鼠胃泌酸粘膜層Ghrelin陽性細胞比正常對照組顯著增加，給予D-Lys3-GHRP-6后，糖尿病組及對照組Ghrelin陽性細胞表達均加強。5、糖尿病組小鼠血漿胰高血糖水平顯著高

5、于正常小鼠(p＜0.05)，Ghrelin受體阻斷劑可以使增高的胰高血糖水平恢復正常，但并不影響正常小鼠胰高血糖素水平。結(jié)論：Ghrelin是重要的內(nèi)源性促進食欲的神經(jīng)肽，糖尿病的多食是由于Ghrelin激活下丘腦NPY神經(jīng)元，降低α-MSH神經(jīng)元活性所致。 STZ誘導的Ghrelin基因敲除糖尿病小鼠攝食的調(diào)節(jié) STZ誘導的糖尿病小鼠血漿Ghrelin水平顯著升高，腹腔注射Ghrelin受體阻斷劑可顯著降低24小時及2

6、小時(10am-12am)糖尿病小鼠攝食。Ghrelin在調(diào)節(jié)糖尿病小鼠的多食中起著重要的作用。為進一步證實Ghrelin是促進糖尿病小鼠食欲的重要調(diào)節(jié)因子。 本實驗目的是：1、用Ghrelin基因敲除(Ghrelin-/-)及Ghrelin野生型(Ghrelin+/+)STZ糖尿病小鼠，觀察比較Ghrelin基因絕對缺乏時，糖尿病小鼠的攝食及其他相關(guān)指標的變化。2、檢測其下丘腦攝食調(diào)節(jié)肽NPY，Orexin及α-MSH神經(jīng)元的

7、活性表達，探討Ghrelin調(diào)節(jié)攝食的中樞機制。方法：1、用STZ誘導Ghrelin野生型(Ghrelin+/+)和Ghrelin基因敲除(Ghrelin-/-)(n=12)小鼠制作糖尿病模型，檢測血漿血糖，胰高血糖素，攝食，體重和脂肪墊的變化；2、用免疫熒光組化技術(shù)檢測下丘腦Ghrelin，NPY，α-MSH和Orexin等神經(jīng)肽免疫活性細胞，用激光共聚焦技術(shù)分析下丘腦各神經(jīng)肽核團攝食肽和厭食肽免疫活性的表達。3、放射免疫實驗檢測血漿

8、胰高血糖素。實驗結(jié)果顯示：1、與Ghrelin+/+糖尿病小鼠組比較，Ghrelin-/-糖尿病小鼠組的多食反應減弱，其24小時最大攝食增加量(70％)明顯少于Ghrelin+/+糖尿病小鼠的攝食增加量(141％)(p＜0.05)；2、Ghrelin-/-糖尿病小鼠體重減少較Ghrelin+/+糖尿病小鼠更加明顯(p＜0.05)，比Ghrelin+/+糖尿病組多減少了12.4％；3、Ghrelin-/-糖尿病小鼠下丘腦NPY免疫陽性神經(jīng)

9、元數(shù)沒有明顯的增加；在健康對照Ghrelin-/-小鼠，其α-MSH免疫陽性神經(jīng)元數(shù)(1128±92/mm2)高于健康對照Ghrelin+/+鼠的α-MSH免疫陽性細胞數(shù)(745±52/mm2)。在兩種基因型(Ghrelin+/+，Ghrelin-/-)的糖尿病小鼠中，α-MSH的表達均減少(57.3％Ghrelin+/+；49.7％Ghrelin-/-)。結(jié)論：Ghrelin-/-糖尿病小鼠攝食明顯低于Ghrelin+/+糖尿病小鼠。

10、Ghrelin-/-糖尿病小鼠不伴有下丘腦NPY的表達顯著增加，但α-MSH降低，因此導致Ghrelin-/-糖尿病小鼠食欲輕度增加。 Ghrelin受體基本活性信號對胃運動的調(diào)節(jié)作用 背景和目的：新近首次發(fā)現(xiàn)的生長激素促分泌劑受體(GHS-R)的內(nèi)源性配體是一個由28個氨基酸組成，名為Ghrelin的多肽，它與生長激素促分泌劑受體(GHS-R)結(jié)合，增強胃腸運動，促進胃酸分泌，提高食欲，增加體重。在眾多的生長激素促分泌劑中