IL-1β，TNF-α和IFN-γ對(duì)表皮葡萄球菌生物被膜相關(guān)基因表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討細(xì)胞因子IL-1β,TNF-α和IFN-γ在不同濃度下對(duì)介導(dǎo)表皮葡萄球菌生物膜形成的胞間多糖黏附素(polysaccharide intercellular adhesion，PIA)主要合成基因icaA及icaD表達(dá)的影響，探索免疫細(xì)胞因子與表皮葡萄球菌感染的關(guān)系，為臨床治療表皮葡萄球菌感染及藥物的合理應(yīng)用提供新思路。
　　 方法：在細(xì)胞因子培養(yǎng)下，采用PCR法擴(kuò)增生物膜形成相關(guān)結(jié)構(gòu)基因icaA，icaD及管家基因g

2、yrB。同時(shí)采用SYBR Green1 熒光RT-PCR(Fluorescence ReverseTranscriptase-PCR)半定量法檢測(cè)上述培養(yǎng)環(huán)境下形成生物膜的主要結(jié)構(gòu)基因icaA及icaD在細(xì)胞對(duì)數(shù)生長(zhǎng)中期的表達(dá)的變化。
　　 結(jié)果：PCR 擴(kuò)增可見(jiàn)sep1 菌株生物膜結(jié)構(gòu)基因icaA和icaD 同時(shí)表達(dá)，并可見(jiàn)管家基因gyrB的條帶。SYBR Green1 熒光RT-PCR檢測(cè)顯示，在IL-1β影響下，icaA及

3、icaD改變不明顯，TNF-α和IFN-γ可下調(diào)icaD的表達(dá)，在TNF-α濃度為100ng/ml時(shí)達(dá)到最大抑制狀態(tài)，在IFN-γ濃度為10ng/ml，icaD基因的表達(dá)最低。三種細(xì)胞因子對(duì)icaD基因的表達(dá)在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著差異F=10.753，P＜0.05；而對(duì)icaA的表達(dá)在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)顯著性差異F=0.443，P＞0.05。
　　 結(jié)論：IL-1β對(duì)表皮葡萄球菌(sep)生物膜結(jié)構(gòu)基因icaA及icaD 影響不明顯，而TNF