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文檔簡介
1、神經(jīng)老化是生命活動的必然,探討神經(jīng)老化機制,尋找延緩神經(jīng)老化進程的方法是神經(jīng)科學領域里的一個重要內容。在腦衰老研究中,突觸可塑性備受人們關注。δ-連環(huán)素(δ-catenin)與樹突棘素(Spinophilin)是近年來發(fā)現(xiàn)的分布于神經(jīng)元樹突的蛋白,在突觸塑形中扮演重要角色。δ-catenin是p120-catenin(p120ctn)蛋白家族成員,具有能和鈣粘素(cadherins)近膜端結合的序列,δ-catenin是這一蛋白家族唯一
2、特異性只表達于神經(jīng)系統(tǒng)的蛋白,它能和突觸后成分蛋白的PDZ結構域結合。δ-catenin定位于突觸后區(qū)域,能調節(jié)突觸的傳入和塑形。Spinophilin因其特異性定位于樹突棘頭部,故得名樹突棘素。它具有細胞連接處絞手架蛋白(scaffoldprotein)的特征,并且含有和PSD95/DLG/zo-1相同的序列,是蛋白磷酸酶-1(PP1)新的靶向亞單位,能將PP1定位于樹突棘的底物(如受PP1調節(jié),從而影響突觸功能的神經(jīng)遞質受體)上,調
3、節(jié)樹突棘的形態(tài),完成突觸塑形。小腦是腦衰老機理研究的理想模型系統(tǒng)之一。 本實驗在建立大鼠自然老化模型的基礎上,運用免疫組織化學方法檢測δ-catenin及spinophilin在不同年齡大鼠小腦的定位表達;運用圖像分析系統(tǒng)和免疫印跡(Western-blot)技術檢測δ-catenin及spinophilin在大鼠小腦的表達水平;運用RT-PCR技術檢測δ-catenin,spinophilinmRNA在不同年齡組大鼠小腦表達的
4、差異。 免疫組織化學檢測顯示δ-catenin,spinophilin主要表達在小腦分子層和顆粒層,在中、青年大鼠蒲肯野細胞有中等陽性表達,老年大鼠蒲肯野細胞表達較弱。Westernblot檢測顯示δ-catenin、spinophilin在中年組大鼠小腦表達最高,在老年組大鼠小腦表達最低。RT-PCR檢測顯示δ-catenin、spinophilinmRNA表達水平的增齡性變化與其蛋白表達的增齡性變化一致。 本實驗研究
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