熱休克蛋白90α對(duì)食管癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響.pdf

1、目的:探討HSP90α在食管癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移中的作用機(jī)制。
　　方法:使用細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)將siRNA-HSP90α轉(zhuǎn)染入CE81T-4細(xì)胞中，并分為實(shí)驗(yàn)組、陰性對(duì)照組、空白對(duì)照組;并用RT-PCR和Western blot檢測(cè)3組細(xì)胞中HSP90αmRNA水平和蛋白質(zhì)水平的表達(dá)差異，驗(yàn)證是否轉(zhuǎn)染成功。MTT法檢測(cè)3組細(xì)胞的增值活力，流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期、凋亡的改變，劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell體外侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)染后CE81T-4細(xì)胞

2、遷移和侵襲的變化。
　　結(jié)果:在siRNA-HSP90α成功轉(zhuǎn)染CE81T-4細(xì)胞后，RT-PCR檢測(cè)3組結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組中HSP90αmRNA水平表達(dá)量顯著低于空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組(P＜0.05，P＜0.05)。Western blot分析顯示實(shí)驗(yàn)組HSP90α蛋白表達(dá)量降低，與空白對(duì)照組和陰性組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，P＜0.05）。MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的增殖能力明顯減弱，與其他兩組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

3、義(P＜0.05,P＜0.05)。HSP90α基因表達(dá)沉默后，細(xì)胞凋亡率為32.67％，較空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組明顯增加(P＜0.05，P＜0.05)。實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞周期被阻滯在G0/G1期。Transwell體外侵襲實(shí)驗(yàn)顯示實(shí)驗(yàn)組侵襲遷移的細(xì)胞個(gè)數(shù)為（76.4±8.7），顯著低于空白照組（140.3±5.8，P＜0.05）與陰性對(duì)照組（129.3±10.1，P＜0.05）。劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，72h后實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的遷移力較其他兩組明顯降低。<