異丙隆殘留酶聯(lián)免疫分析方法的研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)以異丙隆為研究對(duì)象，在獲得異丙隆抗體的基礎(chǔ)上，建立了間接競(jìng)爭(zhēng)和生物素-親和素酶聯(lián)免疫分析法(BAS-ELISA)。
　　 建立了異丙隆的間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法。用方陣滴定對(duì)包被抗原([1-(3-丙基羧基)-3-(4-異丙基苯基)-1-甲基脲]-OVA)和抗血清的濃度進(jìn)行優(yōu)化。優(yōu)化的包被抗原和抗血清的濃度分別為0.1 mg/L和0.016mg/L。對(duì)1％的OVA和3％的脫脂奶粉作為封閉劑進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果表明3％的脫脂奶粉有較高的

2、靈敏度?？疾炝擞袡C(jī)溶劑甲醇對(duì)抗原抗體結(jié)合反應(yīng)的影響，結(jié)果表明：甲醇含量在0-10％時(shí)，IC50變化不大。在優(yōu)化的條件下，建立了異丙隆的間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法標(biāo)準(zhǔn)曲線。線性回歸方程為：抑制率(I)=3.63+35.73 lgC(r=0.993)。IC20、IC50和IC50值分別為3.42 ng/mL、21.14 ng/mL和121.3ng/mL。分析方法的測(cè)定范圍是3.42-121.3 ng/mL。異丙隆和其它六種常用的與異丙隆結(jié)構(gòu)相似的

3、脲類除草劑的交叉反應(yīng)結(jié)果表明：異丙隆與這六種結(jié)構(gòu)相似的脲類除草劑包括氯溴隆、氟草隆和綠谷隆的交叉反應(yīng)率都小于0.51％，即這六種農(nóng)藥不干擾異丙隆的測(cè)定。
　　 用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法分別對(duì)土壤和面粉中的異丙隆進(jìn)行添加回收試驗(yàn)，土壤中的樣品加標(biāo)回收率在100％-108％，變異系數(shù)為3％-6％。面粉中的樣品加標(biāo)回收率在81％-84％，變異系數(shù)為5％-7％。該方法可用于土壤和面粉中的異丙隆的檢測(cè)，處理大量樣品分析時(shí)可用于初步篩選。

4、r>　　 建立了異丙隆的生物素-親和素酶聯(lián)免疫分析法(BAS-ELISA)。用方陣滴定優(yōu)化的包被抗原和抗血清的最佳濃度分別為0.1 mg/L和0.016mg/L。優(yōu)化的生物素化山羊抗兔的最佳稀釋倍數(shù)為500倍。在優(yōu)化的條件下建立了異丙隆的生物素親和素酶聯(lián)免疫法的標(biāo)準(zhǔn)曲線。線性回歸方程為：抑制率(D=7.29+24.27 lg C(r=0.986)。IC20、IC50和IC80值分別為4.79 ng/mL、57.14 ng/mL和593