間充質(zhì)干細(xì)胞治療慢性間質(zhì)性腎炎動物模型意義初探.pdf

1、目的：
　　 通過成功制備腺嘌呤所致慢性間質(zhì)性腎炎（CIN）的動物模型，將培養(yǎng)的間充質(zhì)（MSCs）通過尾靜脈的方法注射入大鼠體內(nèi)，進(jìn)一步評價干細(xì)胞評價間充質(zhì)干細(xì)胞在治療慢性間質(zhì)性腎炎動物模型治療效果。
　　 方法：
　　 采用腺嘌呤（100mg/kg/d）持續(xù)灌胃的方法，連續(xù)4周，此后停藥4周，檢測部分大鼠的臨床、生化指標(biāo)，判斷動物模型的情況，在制備模型的過程中，另取Wistar大鼠，成功剝離股骨，取出骨髓至細(xì)胞

2、懸液后，于培養(yǎng)皿中分離培養(yǎng)，當(dāng)細(xì)胞基本貼壁、鋪滿瓶底，且大部分細(xì)胞培養(yǎng)成梭形時進(jìn)行傳代，連續(xù)傳3代后備用，此后采用免疫組化方法，鑒定培養(yǎng)細(xì)胞CD90、CD34的表達(dá)，確定模型、細(xì)胞培養(yǎng)均成功后，將剩余大鼠隨機(jī)分為三組（A、B和C），A組（移植組）尾靜脈注射培養(yǎng)好的間充質(zhì)干細(xì)胞，B組（非移植組）注入等量生理鹽水，C組（對照組）不予干預(yù)，每日觀察大鼠的臨床表現(xiàn)、體重變化，至觀察4周后，將大鼠處死，檢測大鼠處死前的臨床表現(xiàn)、腎功情況以及處死后

3、腎臟的病理變化。
　　 結(jié)果：
　　 動物模型制備情況：腺嘌呤灌胃組大鼠表現(xiàn)出明顯的體重下降、多飲多尿、毛發(fā)脫落、精神萎頓、抽搐甚至死亡，將上述癥狀自制成臨床癥狀評分表格，同血清肌酐進(jìn)行相關(guān)分析，發(fā)現(xiàn)兩者呈現(xiàn)明顯的相關(guān)性，判斷臨床癥狀評分表格成功，同對照組相關(guān)，腺嘌呤灌胃組無論從臨床評分、生化以及病理評分同對照組相比均表現(xiàn)出統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），且病理表現(xiàn)以腎小管、間質(zhì)損害為主，小球損害輕微，判斷動物模型制作成功，

4、間充質(zhì)干細(xì)胞：可見細(xì)胞培養(yǎng)貼滿瓶底，細(xì)胞變形成梭形，部分融合，抗體表達(dá)CA90+、CD34-，判斷間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)成功。在進(jìn)行間充質(zhì)干細(xì)胞治療過程中，與正常對照組相比，移植組、非移植組從臨床表現(xiàn)、生化指標(biāo)以及病理結(jié)果均有不同程度的惡化，三組相比存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），但當(dāng)移植組與非移植組進(jìn)行比較時，兩組差異并不明顯，未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 腺嘌呤大鼠動物模型制備成功，間充質(zhì)干細(xì)胞不能