肝細(xì)胞癌中WIF-1基因甲基化及其表達(dá)的研究.pdf

1、肝細(xì)胞癌(以下簡(jiǎn)稱肝癌)是臨床上最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率和在腫瘤相關(guān)死亡中占據(jù)的比例均很高,嚴(yán)重威脅著人類的健康,因此,肝癌的防治成為腫瘤研究的重要課題。肝癌的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)涉及多基因多步驟的復(fù)雜過(guò)程,其分子機(jī)制仍未完全闡明,抑癌基因啟動(dòng)子區(qū)異常高甲基化可導(dǎo)致抑癌基因失活,是肝癌發(fā)生的重要因?yàn)橹?。本文通過(guò)檢索相關(guān)文獻(xiàn),分析肝癌發(fā)生的分子途徑,選取Wnt途徑中WIF-1基因作為研究對(duì)象,檢測(cè)其在肝癌中的甲基化和表達(dá)水平,結(jié)合臨床資

2、料探討其臨床意義。
　　 目的:探討WIF-1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化的狀態(tài)與WIF-1 mRNA表達(dá)和肝癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系,評(píng)價(jià)檢測(cè)肝癌WIF-1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化和基因表達(dá)的臨床意義。
　　 方法：收集53例成對(duì)的肝癌及相應(yīng)癌旁組織,采用實(shí)時(shí)定量甲基化特異性PCR(Q-MSP)技術(shù)對(duì)組織中WIF-1基因的甲基化水平進(jìn)行相對(duì)定量檢測(cè)；應(yīng)用實(shí)時(shí)定量RT-PCR(Q-RT-PCR)檢測(cè)53例成對(duì)肝癌及相應(yīng)癌旁組織、22例肝炎后肝硬

3、化、4例慢性肝炎和11例正常肝組織的WIF-1 mRNA的表達(dá)水平,分析WIF-1甲基化狀態(tài)與mRNA表達(dá)水平的關(guān)系以及兩者與臨床資料間的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：Q-MSP檢測(cè)結(jié)果表明WIF-1基因在肝癌組織和癌旁組織中甲基化陽(yáng)性例數(shù)分別為20例(37.7％)和3例(5.7％),癌組織中WIF-1基因甲基化頻率顯著高于癌旁組織；ROC分析表明WIF-1基因甲基化水平的差異可以高效地鑒別癌組織與非癌組織；Kaplan-Meier生存

4、曲線分析顯示甲基化陽(yáng)性病例組的無(wú)瘤生存期顯著低于甲基化陰性病例組；WIF-1基因的甲基化狀態(tài)與性別、年齡、腫塊數(shù)目、是否肝硬化、Child-push分級(jí)及TNM分期等因素均未見(jiàn)明顯相關(guān)。
　　 對(duì)WIF-1 mRNA在各組組織中表達(dá)水平的分析顯示:正常肝組織與肝硬化、肝癌、癌旁組織組間的表達(dá)均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,正常肝組織組基因表達(dá)水平高于除慢性肝炎的其它各組；肝癌組基因表達(dá)水平顯著低于癌旁組織組。WIF-1基因表達(dá)水平與臨床資料相

5、關(guān)性分析未見(jiàn)明顯相關(guān)性,高表達(dá)組和低表達(dá)組的無(wú)瘤生存期未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 53例成對(duì)肝癌及癌旁組織標(biāo)本中,肝癌組織相對(duì)于癌旁組織WIF-1表達(dá)顯著下調(diào)的有31例,其中,在甲基化陽(yáng)性、陰性標(biāo)本里分別為11例(55％)和20例(60.6％)。肝癌與癌旁組織WIF-1 mRNA表達(dá)的下調(diào)與甲基化狀態(tài)之間未見(jiàn)相關(guān)性。
　　 結(jié)論：檢測(cè)WIF-1基因的甲基化狀況有助于肝癌的診斷與預(yù)后評(píng)估,可能作為一種具有臨床診斷價(jià)值的分子標(biāo)志