血小板液態(tài)保存過程中代謝及體外功能變化的研究.pdf

1、目前臨床供應(yīng)的血小板成分主要是常溫(22±2℃)液態(tài)保存的血小板，包括手工制備濃縮血小板和機(jī)采血小板。對于液態(tài)保存血小板制品的質(zhì)量評價，除了應(yīng)符合血液和血液制品常規(guī)檢測項目標(biāo)準(zhǔn)外，主要限定在產(chǎn)品中的血小板得率、白細(xì)胞殘留量、紅細(xì)胞殘留量及pH值等指標(biāo)，而缺乏對于血小板保存期內(nèi)主要代謝指標(biāo)、體外功能狀態(tài)的具體要求，從而造成臨床供應(yīng)的血小板制品質(zhì)量參差不齊，影響臨床輸注效果。本研究旨在通過對血小板在保存過程中代謝指標(biāo)、體外功能的系統(tǒng)監(jiān)測，全

2、面掌握血小板離體后代謝和體外功能的變化規(guī)律及其相互關(guān)系，遴選出可以全面有效反映血小板功能的指標(biāo)，優(yōu)化血小板制備工藝，為建立起全面的血小板質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系奠定基礎(chǔ)。 一、機(jī)采血小板保存過程中代謝及體外功能變化機(jī)采血小板在體外液態(tài)保存9d過程中，乳酸與H<'+>逐漸堆積，pH值隨之下降；血小板低滲休克反應(yīng)在7d時開始明顯下降；CD62p表達(dá)率隨保存天數(shù)逐步增高，凝血酶激活后CD62p再表達(dá)率逐步下降；血氣、葡萄糖、乳酸等代謝指標(biāo)與血小板

3、低滲休克反應(yīng)、CD62p的表達(dá)率及再表達(dá)率之間具有顯著相關(guān)性。通過對代謝指標(biāo)的監(jiān)測可以間接反映機(jī)采血小板體外功能的變化，從而對血小板保存質(zhì)量作出系統(tǒng)評價。 二、白膜法手工制備濃縮血小板質(zhì)量評價及方法優(yōu)化第一次離心：四檔轉(zhuǎn)速、四個離心時間條件組合成16組離心條件。其中有四組離心條件所得血小板得率達(dá)到了國家標(biāo)準(zhǔn)，分別是2400rpm(1861g)：15min、17min；2600rpm(2184g)：15min、17min。而240

4、0 rpm(1861g)：15min離心條件所得的血小板初產(chǎn)品，在滿足血小板得率的基本質(zhì)量要求的情況下，血小板損傷相對最小，功能儲備最佳，因此選定2400rpm(1861g)：15min作為最佳的第一次離心條件。 第二次離心：三檔轉(zhuǎn)速、三個離心時間條件所得血小板終產(chǎn)品中血小板得率、白細(xì)胞殘留率、紅細(xì)胞殘留率結(jié)果表明：只有1100rpm(391g)：6min所得血小板得率、白細(xì)胞殘留率、紅細(xì)胞殘留率均符合國家標(biāo)準(zhǔn)，因此選定1100

5、 rpm(391g)：6min為最佳的第二次離心條件。 三、白膜法手工制備濃縮血小板與機(jī)采血小板質(zhì)量對比兩組的血小板得率、紅細(xì)胞殘留量、白細(xì)胞殘留量都分別達(dá)到相應(yīng)的國家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，但在達(dá)到相同血小板計數(shù)的情況下，白膜法手工制備濃縮血小板組的紅細(xì)胞殘留量、白細(xì)胞殘留量明顯高于機(jī)采血小板組(P<0.01)；兩組的乳酸、血小板膜表面CD62p表達(dá)率均隨保存時間延長而升高；兩組問比較，白膜法手工制備濃縮血小板組CD62p表達(dá)率在保存0-5

6、d均高于機(jī)采血小板組(P<0.01)。兩組的pH值、凝血酶激活后CD62p再表達(dá)率均隨保存時間的延長而下降；兩組間比較，2-5d白膜法組pH值明顯低于機(jī)采血小板組(P<0.01)，0-5d白膜法組CD62p再表達(dá)率明顯低于機(jī)采血小板組(P<0.01)。機(jī)采血小板組血小板低滲休克反應(yīng)水平在0-5d無明顯變化，而白膜法手工制備濃縮血小板組血小板低滲休克反應(yīng)水平隨保存時間的延長而下降，保存1-5d時均明顯低于機(jī)采血小板組(P<0.01)。結(jié)論