血小板與人工心臟瓣膜接觸后其構(gòu)象與功能變化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究血小板與人工心臟瓣膜接觸后其構(gòu)象與功能的變化，探討了血小板受人工心臟瓣膜影響所引起血栓形成及促發(fā)凝血的過程，指導(dǎo)臨床合理用藥，并為臨床提供更高血液相容性的瓣膜。 方法： (1)檢測血小板溶解后的釋放物乳酸脫氫酶(LDH)，定量評價(jià)當(dāng)前臨床使用的熱解碳人工心臟瓣膜(LTIC)表面粘附的血小板量。(2)采用單克隆抗體原位檢測血小板活化后的特定釋放物-a顆粒膜蛋白140(GMP140)，定量評價(jià)熱解碳人工心臟瓣膜對血小板的激

2、活水平。(3)熱解碳人工心臟瓣膜與鈦氧膜(Ti-O)涂層心臟瓣膜樣品進(jìn)行血小板粘附對比實(shí)驗(yàn)，用光學(xué)顯微鏡進(jìn)行血小板的觀察和統(tǒng)計(jì)，并通過掃描電鏡觀察血小板的形態(tài)。(4)動物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：熱解碳人工心臟瓣膜與鈦氧膜涂層心臟瓣膜制成3×2mm2樣品，分別植入犬股動脈內(nèi)，于17天、30天、90天取出，大體觀察并通過掃描電鏡觀察樣品表面沉積物。 結(jié)果：(1)乳酸脫氫酶(LDH)定量測定顯示熱解碳人工心臟瓣膜樣品血小板濃度24.6±1.1％，說

3、明血小板與人工心臟瓣膜接觸后即刻粘附于上面。(2)a顆粒膜蛋白140(GMP140)測定顯示血小板在熱解碳人工心臟瓣膜樣品表面活化程度為30.8±1.3％，說明血小板與人心臟瓣膜接觸后發(fā)生了激活。(3)光鏡下LTIC樣品表面粘附的血小板數(shù)量在1115±42個，Ti-O樣品表面粘附的血小板數(shù)量在298±12個；LTIC樣品表面活化的血小板程度占總數(shù)的89±4％，Ti-O樣品表面活化的血小板程度占總數(shù)的20±3％；兩組之間比較，p＜0.05

4、，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。掃描電鏡下LTIC樣品表面的血小板都產(chǎn)生了大量偽足，交聯(lián)在一起，形成團(tuán)聚態(tài)，Ti-O樣品表面血小板形態(tài)較規(guī)則，變形及偽足較小，基本無團(tuán)聚。(4)動物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：大體觀察LTIC樣品表面有小血栓形成，組織增生較明顯；Ti-O樣品表面光滑，未產(chǎn)生血栓，組織薄。掃描電鏡下17天的LTIC表面粘附大量變形和生成偽足的血小板及紅細(xì)胞，形成血栓，底層機(jī)化，Ti-O表面粘附少，無血栓；30天及90天的LTIC表面為三維堆垛狀陳舊血栓

5、，Ti-O表面少量細(xì)胞粘附，形態(tài)完整。 結(jié)論：(1)人工心臟瓣膜植入體內(nèi)后，與血液接觸，首先是血液中各類血漿蛋白彼此競爭吸附在人工瓣膜表面上；繼而才是被吸附的血漿蛋白與血小板的相互作用，激活血小板；接下來活化的血小板發(fā)生一系列構(gòu)象和功能變化形成血栓。(2)血小板接觸了人工心臟瓣膜，造成了本身構(gòu)象變化，與已吸附在瓣膜上的暴露了位點(diǎn)的纖維蛋白原結(jié)合，促進(jìn)自身粘附、釋放和聚集，易形成血栓和促發(fā)凝血。(3)本實(shí)驗(yàn)研究了血小板與人工心臟瓣