儲存血小板中血小板微粒的來源、制備及功能初探.pdf

1、目的:從手工濃縮血小板中制備血小板微粒(PMP)，并探索PMP的止凝血功能及來源。
　　方法:取常規(guī)儲存第1、3、5、7、9、11天的濃縮血小板，流式細(xì)胞儀檢測CD61抗體標(biāo)記的樣本中PMP含量。低速離心(20℃、2500×g、30min)儲存第1、8、15、22、29天的濃縮血小板，下層沉淀用于檢測離心對血小板CD62p及磷脂酰絲氨酸(PS)表達(dá)的影響;上層液高速離心(20℃、15000×g、45min)獲得PMP。對離心獲取的

2、PMP顆粒理化性質(zhì)和功能進(jìn)行檢測，包括:顆粒大小、膜表面蛋白受體和PS、凝血酶生成能力。PMP的來源研究采取分析儲存血小板生理狀態(tài)的方法:取儲存第0、1、3、5、7、9、11天的濃縮血小板，以CD62p作為血小板活化狀態(tài)指標(biāo)、以ΔΨm和PS作為血小板凋亡狀態(tài)指標(biāo)，利用流式細(xì)胞儀檢測血小板各項指標(biāo)的表達(dá)。
　　結(jié)果:常規(guī)儲存9天起濃縮血小板中PMP含量顯著增加，且離心剪切力對其獲取無影響;制備儲存第9天的PMP，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)其大小不均