MTA1基因?qū)m頸癌侵襲轉(zhuǎn)移的作用及其機(jī)制研究.pdf

1、轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1（metastasis-associated gene l，MTA1）是一個(gè)與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)、具有組蛋白脫乙?；钚缘幕颍ㄟ^改變組蛋白的乙?；癄顟B(tài)進(jìn)而調(diào)控基因表達(dá)。本研究探討了MTA1基因的改變對(duì)宮頸癌惡性表型的影響。
　　 （1）免疫組化研究我們用免疫組化法檢測(cè)了正常宮頸、宮頸癌以及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組織中MTA1蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果顯示，與正常宮頸上皮相比，宮頸癌與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌組織中MTA1陽性細(xì)胞數(shù)量及染色強(qiáng)度均明

2、顯增高。宮頸癌中MTA1蛋白的過表達(dá)發(fā)生率為64％，高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶（47.62％）。正常宮頸中MTA1蛋白定位于細(xì)胞核；宮頸癌組織中MTA1則出現(xiàn)了細(xì)胞核/細(xì)胞漿/細(xì)胞膜的多種形式的蛋白定位，表明在腫瘤發(fā)生過程中存在MTA1表達(dá)和定位的紊亂。宮頸癌中MTA1蛋白的過表達(dá)與淋巴轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)深度及脈管浸潤(rùn)有關(guān)，與組織學(xué)類型、分化程度無關(guān)。相關(guān)性分析顯示MTA1蛋白與抑癌基因PTEN蛋白的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。Kaplan-Meier生存分析未提示M

3、TA1是宮頸癌的不良預(yù)后因素，需要擴(kuò)大樣本進(jìn)一步研究。
　　 （2）細(xì)胞效應(yīng)學(xué)實(shí)驗(yàn)1）宮頸癌細(xì)胞系中，免疫熒光顯示Hela細(xì)胞中MTA1蛋白主要定位于細(xì)胞核，而CaSki細(xì)胞的胞核和胞漿均呈陽性表達(dá)。RT-PCR及Western blot顯示CaSki細(xì)胞中MTA1mRNA及蛋白表達(dá)高于Hela細(xì)胞。2）瞬時(shí)轉(zhuǎn)染MTA1-SiRNA入CaSki細(xì)胞，可見細(xì)胞生長(zhǎng)減慢，克隆形成及劃痕愈合能力下降，但對(duì)細(xì)胞周期的改變不明顯。隨著干擾

4、濃度的增加、時(shí)間的延長(zhǎng)，siRNA對(duì)MTA1 mRNA表達(dá)的抑制作用逐漸增強(qiáng)。3）RT-PCR、Western blotting、MTT、transwell及細(xì)胞粘附等方法顯示穩(wěn)定轉(zhuǎn)染MTA1表達(dá)質(zhì)粒能促進(jìn)CaSki細(xì)胞的生長(zhǎng)、克隆形成及劃痕愈合能力，促進(jìn)細(xì)胞的體外粘附、侵襲細(xì)胞外基質(zhì)及體外遷移能力；RNA干擾質(zhì)粒沉默MTA1基因表達(dá)則具有相反作用，但對(duì)細(xì)胞周期的改變不明顯。RT-PCR結(jié)果顯示MTA1基因表達(dá)水平的改變，能導(dǎo)致多個(gè)轉(zhuǎn)移

5、相關(guān)基因表達(dá)的改變，包括粘附分子、癌基因及抑癌基因等。
　　 （3）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)在建立的CaSki細(xì)胞裸鼠皮下成瘤模型中，轉(zhuǎn)染MTA1基因表達(dá)質(zhì)粒的細(xì)胞體內(nèi)成瘤能力增強(qiáng)，而轉(zhuǎn)染MTA1基因干擾質(zhì)粒的細(xì)胞體內(nèi)成瘤能力顯著下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 本研究得出以下結(jié)論：宮頸癌組織中MTA1蛋白的表達(dá)明顯升高，與抑癌基因PTEN的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，與腫瘤的惡性生物學(xué)行為關(guān)系密切，其表達(dá)異?？赡軈⑴c了宮頸癌的發(fā)生發(fā)展過程。MTA1