AEG-1在宮頸癌中的表達(dá)及其作用機(jī)制研究.pdf

1、第一部分AEG-1在人宮頸癌組織中的表達(dá)及意義
　　【目的】
　　探討AEG-1在宮頸癌組織中的表達(dá)及其與臨床病理特征之間的關(guān)系。
　　【方法】
　　利用免疫組織化學(xué)方法檢測21例正常宮頸上皮組織、11例CIN組織、70例宮頸癌組織(鱗狀細(xì)胞癌58例,腺癌12例)中的AEG-1的表達(dá)情況,并分析其與臨床病理特征之間的關(guān)系。
　　【結(jié)果】
　　AEG-1蛋白主要表達(dá)在宮頸癌細(xì)胞的核周和胞漿中。AEG-1

2、蛋白在CIN、宮頸鱗癌、宮頸腺癌組織中的表達(dá)水平明顯高于其在正常宮頸上皮組織中的表達(dá)水平,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05);AEG-1蛋白的表達(dá)水平與臨床分期、組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與肌層浸潤深度之間密切相關(guān),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05);AEG-1蛋白的表達(dá)水平與患者的年齡、組織類型之間無密切關(guān)系(p>0.05)。
　　【結(jié)論】
　　AEG-1在宮頸癌中呈高表達(dá)水平,可能參與了宮頸癌的發(fā)生發(fā)展過程,AEG-1的表達(dá)水平

3、可能是潛在的預(yù)測宮頸癌的惡性程度和預(yù)后的重要指標(biāo)之一,為其分子靶向治療提供參考。
　　第二部分siRNA下調(diào)AEG-1對人宮頸癌細(xì)胞系生物學(xué)行為的影響及其機(jī)制
　　【目的】
　　探討siRNA下調(diào)astrocyte elevated gene-1(AEG-1)對人宮頸癌細(xì)胞系Hela、Siha、C33a的增殖凋亡和侵襲轉(zhuǎn)移的影響及其機(jī)制。
　　【方法】
　　用設(shè)計合成的AEG-1siRNA轉(zhuǎn)染人宮頸癌細(xì)胞系

4、Hela、Siha、C33a后,RT-PCR和western blot法檢測AEG-1和β-catenin以及上皮細(xì)胞間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)相關(guān)因子(E-cadherin、N-cadherin和vimentin)的mRNA和蛋白表達(dá)水平的變化;細(xì)胞免疫熒光更直觀地觀察細(xì)胞中AEG-1蛋白表達(dá)水平的變化;CCK8法檢測沉默AEG-1對人宮頸癌細(xì)胞系的增殖抑制的影響;劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell小室法檢測沉默AEG-1對人宮頸癌細(xì)胞系的侵襲遷

5、移能力的影響;流式細(xì)胞術(shù)檢測沉默AEG-1對人宮頸癌細(xì)胞系的凋亡的影響。
　　【結(jié)果】
　　用AEG-1siRNA轉(zhuǎn)染人宮頸癌細(xì)胞系Hela、Siha、C33a后,RT-PCR和Western blot結(jié)果證實(shí)AEG-1的mRNA和蛋白的表達(dá)水平均明顯降低;細(xì)胞免疫熒光結(jié)果示沉默AEG-1后,細(xì)胞核周和細(xì)胞質(zhì)中的AEG-1表達(dá)明顯減少;CCK8實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明沉默AEG-1能顯著抑制細(xì)胞增殖能力;Transwell小室法結(jié)果表明

6、沉默AEG-1細(xì)胞侵襲遷移能力明顯減弱;流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果表明沉默AEG-1后細(xì)胞調(diào)亡率明顯增加。沉默AEG-1后β-catenin、N-cadherin和vimentin的mRNA和蛋白的表達(dá)水平均明顯降低,E-cadherin的mRNA和蛋白的表達(dá)水平升高。
　　【結(jié)論】
　　沉默AEG-1可以顯著抑制人宮頸癌細(xì)胞系Hela、Siha、C33a的增殖和侵襲遷移能力,并誘導(dǎo)其凋亡;AEG-1可能通過β-catenin信號通