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文檔簡介
1、紅曲是一種“藥食同源”的典型代表真菌,紅曲培養(yǎng)物具有多種生理活性物質(zhì),近來新發(fā)現(xiàn)紅曲多糖是一種具有免疫調(diào)節(jié)、保肝解毒功效的活性物質(zhì),本文對紅曲菌液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)多糖的工藝條件、紅曲多糖提取純化和結構的初步鑒定進行研究。 通過對實驗室8株紅曲菌進行篩選,得到一株多糖含量較高的紅曲菌ZKOA;優(yōu)化后的液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基為:蔗糖40g/L,酵母粉4.5g/L,KH2PO4·3H2O3.5g/L,MgSO40.4g/L,植物油2mL/L;優(yōu)化發(fā)
2、酵工藝后得到的發(fā)酵條件是:接種量8%,種齡30h,發(fā)酵液起始pH5.0,發(fā)酵時間90h。在此條件下,紅曲多糖的產(chǎn)率最高可達7.6g/L。在攪拌速率為170r/min,通風量為22NL/min的條件下,20L發(fā)酵罐中紅曲粗多糖含量可達到7.34g/L;在此條件下,發(fā)酵液中紅曲52 多糖的含量(W)與菌體量(X)的關系為W=0.0007X6.1898。 實驗研究了紅曲多糖的脫蛋白工藝,工藝路線為:發(fā)酵液在60℃下濃縮至原體積
3、的1/5→乙醇沉淀得粗多糖→復溶去不容物→上清液用等電點法脫蛋白,去沉淀→0.2%的木瓜蛋白酶45℃酶解3h→Sevag法脫蛋白→得到無游離雜蛋白的多糖溶液。 脫蛋白后多糖溶液中加入4倍體積的工業(yè)酒精,沉淀多糖,沉淀物干燥后為白色,色素和其他小分子物質(zhì)基本得到脫除。 用DEAE—纖維素層析純化多糖提物,依次用純水、0.2mol/LNaCl、0.4mol/L,NaCl、0.6mol/LNaCl洗脫,可以得到三個不同等級分子
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