鼻型結(jié)外NK-T細胞淋巴瘤的免疫表型及EBV分型的研究.pdf

1、鼻型結(jié)外N K ／T 細胞淋巴瘤的免疫表型及E B V 分型的研究摘 要目的：檢測鼻型結(jié)外N K ／T 細胞淋巴瘤( e x t r a n o d a l N K ／T - c e l ll y m p h o m a ，E N K T L )的免疫表型，為臨床病理診斷提供可靠依據(jù)；同時采用P C R 技術檢測E B V 陽性E N K T L 組織中病毒基因分型，初步探討E B V 感染與E N K T L 的關系。方法：選取5 3

2、 例已確診的青島地區(qū)E N K T L 患者作為研究對象，取其石蠟包埋組織進行病理切片，采用免疫組化技術檢測C D 3 ，C D 5 6 ，C D 4 5 R O 三種常用淋巴細胞表面標記物以及兩種細胞毒顆粒蛋白G B ( G r a n z y m e B ) 和T I A ．1 的表達；原位雜交技術檢測腫瘤組織中E B E R l 的轉(zhuǎn)錄表達，篩選鑒定出E B V 陽性E N K T L 標本。切取E B V 陽性患者石蠟包埋組織切

3、片提取D N A ，采用P C R 技術檢測E B V 1 ／2 分型，P C R 結(jié)合限制性片段長度多態(tài)‘l 生( R F L P ) 分析檢測F ／f 分型以及C ／D 分型。結(jié)果：①免疫組化結(jié)果顯示3 種淋巴細胞表面標記物陽性表達率分別為C D 3 ( 3 9 ／5 3 ，7 3 ．6 ％、，C D 5 6 ( 4 6 ／5 3 ，8 6 。8 ％) ，C D 4 5 R O ( 1 2 ／1 3 ，9 2 ．3 0 呦；兩種細胞

4、毒顆粒蛋白的表達率分別為G B ( 4 1 ／4 3 ，9 5 ．3 0 ％) 和T I A ．1 ( 3 5 ／3 5 ，i o o ％) 。②5 3 例E N K T L 患者瘤組織中有5 1 例E R E R l 陽性，陽性率為9 6 ．2 3 ％( 5 1 ／5 3 ) 。③對其中4 0 例E B V 陽性的E N K T L 標本進行病毒基因分型，E B V 基因分型結(jié)果如下：l 型8 5 ％，2 型1 5 ％；F 型8 7

5、．5 ％，f 型1 2 ．5 ％；C 型6 5 ％，D 型3 5 ％。結(jié)論：E N K T L 腫瘤組織中3 種淋巴細胞表面標記物C D 3 ，C D 5 6 ，C D 4 5 R O 以及2 種細胞毒顆粒蛋白G B 和T I A ．1 均具有較高的檢出率和臨床特異性，其中以C D 4 5 R O ，G B 和T I A ．1 的檢出更為敏感，5 種淋巴細胞表面標志物的聯(lián)合檢測有助于E N K T L 的診斷。E N K T L 組織中

6、E B V 感染率高，表明E B V 與E N K T L 的發(fā)生密切相關；青島地區(qū)E B V 陽性E N K T L 組織中E B V 主要型別為1 型，F(xiàn) 型和C 型。碩士研究生：張少燕指導老師：羅兵教授關鍵詞：鼻型結(jié)外N K ／T 細胞淋巴瘤；免疫表型：E B V ；基因分型目 錄引言????????????????????????????????????????????1第一章材料和方法1 ．1 儀器、試劑和耗材????????

7、??????????????????·31 ．2 標本采集??????????????????????????????·41 ．3 免疫組化??????????????????????????????·41 ．4E B V 陽性標本的篩選?????????????????????????‘41 ．5 核酸提取??????????????????????????????61 ．61 ／2 分型、F ／f 分型

8、及C ／D 分型檢測???????????????????．．7第二章結(jié)果??????????????????????????????l O2 ．1 免疫組化結(jié)果???????????????????????????～l O2 ．2E B V 陽性標本的鑒定?????????????????????????1 32 ．3 1 ／2 ( A m ) 分型、C ／D 及F ／f 分型結(jié)果??????????????????一1 3第三章討論

9、??????????????????????????????1 6結(jié)論????????????????????????????????????????????．．1 8參考文獻???????????????????????????????一1 9綜述????????????????????????????????????????????·2 4綜述的參考文獻????????????????????????????”3 3致謝?