雙孔鉀通道TASK-1在缺氧性肺血管收縮中的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：⑴觀察雙孔鉀通道TASK-1在缺氧所致肺動(dòng)脈血管環(huán)張力改變中的作用。⑵探討雙孔鉀離子通道TASK-1介導(dǎo)缺氧性肺動(dòng)脈收縮可能的機(jī)制。
　　方法：從胸心外科手術(shù)室獲得肺腫瘤患者切除的肺組織，然后分離三、四級(jí)肺動(dòng)脈分支,制成肺動(dòng)脈環(huán)，采用RM-6000多導(dǎo)生理記錄儀，觀察經(jīng)c-Src抑制劑PP2、PP2類似物PP3、酪氨酸磷酸酯酶抑制劑bpv預(yù)處理后，對(duì)缺氧所致血管環(huán)張力改變的影響及TASK-1抑制劑A-293預(yù)孵育（100μM

2、）后PP2對(duì)缺氧所致動(dòng)脈環(huán)張力改變的影響。經(jīng)組織塊培養(yǎng)法獲取原代培養(yǎng)人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞（human pulmonary artery smooth muscle cells，hPASMCs），經(jīng)間接免疫熒光染色方法鑒定。第3至第6代用于膜片鉗實(shí)驗(yàn)，觀察缺氧、A-293、PP2、PP3、bpv預(yù)處理后對(duì)TASK-1電流的影響。
　　結(jié)果：①在適宜前負(fù)荷下，肺動(dòng)脈應(yīng)用TASK-1抑制劑A-293后，A-293抑制肺動(dòng)脈缺氧性收縮反應(yīng)，

3、血管張力從1382±263mg降至1138±219 mg，p<0.05。②在適宜前負(fù)荷下，肺動(dòng)脈應(yīng)用c-Src抑制劑 PP2、PP3、bpv后，c-Src抑制劑 PP2抑制肺動(dòng)脈缺氧性收縮反應(yīng)，血管張力分從1379±231mg降至1103±215mg，p<0.05；PP3對(duì)肺動(dòng)脈缺氧性收縮反應(yīng)無影響，血管張力從1403±203mg降至1381±198mg，P>0.05；酪氨酸磷酸酯酶抑制劑bpV增強(qiáng)肺動(dòng)脈缺氧性收縮反應(yīng)，血管張力從135

4、1±213mg升至1632±253mg，p<0.05。③在適宜前負(fù)荷下，肺動(dòng)脈應(yīng)用A-293預(yù)孵育后加入PP2，PP2對(duì)肺動(dòng)脈缺氧性收縮反應(yīng)無影響，血管環(huán)張力1412±264mg至1356±243mg，P>0.05。④缺氧可逆性明顯抑制肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞TASK-1電流（電流密度從0.57±0.06 pA/pF至0.27±0.04 pA/pF，p<0.01），而TASK-1抑制劑A-293可阻斷該抑制效應(yīng)。⑤c-Src特異性抑制劑PP2預(yù)

5、處理后，肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞缺氧敏感性 TASK-1電流消失（電流密度從0.28±0.04 pA/pF至0.26±0.05 pA/pF,P>0.05）；但是 PP2類似物 PP3預(yù)處理后，缺氧仍然可逆性抑制肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞TASK-1（電流密度從0.58±0.04 pA/pF至0.25±0.06 pA/pF，p<0.01）。此外，酪氨酸磷酸酯酶抑制劑bpv預(yù)處理后，肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞TASK-1電流明顯增加（電流密度從0.57±0.06 pA

6、/pF至0.74±0.07 pA/pF, p<0.01），缺氧可明顯抑制該電流（電流密度從0.74±0.07 pA/pF至0.26±0.05 pA/pF, p<0.01）
　　結(jié)論:⑴雙孔鉀通道TASK-1參與人肺血管缺氧性收縮反應(yīng)。⑵雙孔鉀通道TASK-1介導(dǎo)人肺血管缺氧性收縮反應(yīng)的過程具c-Src依賴性。⑶缺氧可逆性抑制肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞TASK-1電流。⑷酪氨酸激酶c-Src可調(diào)控雙孔鉀通道TASK-1。⑸雙孔鉀通道TASK-