枳術(shù)丸對(duì)脾虛便秘小鼠胃腸動(dòng)力靶向調(diào)控的初步探討.pdf

1、【目的】 應(yīng)用復(fù)合因素造模方法建立脾虛便秘小鼠動(dòng)物模型，通過枳術(shù)丸治療該病的藥效學(xué)觀察和P物質(zhì)(substance P,SP)、血管活性肽(vasoactive intestine peptide，VIP)、一氧化氮(nitric oxide，NO)和 cajal 間質(zhì)細(xì)胞(interstitial cells of Cajal,ICC)表達(dá)的變化，探討枳術(shù)丸對(duì)脾虛便秘小鼠胃腸動(dòng)力靶向調(diào)控的可能機(jī)制。 【方法】

2、首先應(yīng)用復(fù)合因素造模法建立脾虛便秘小鼠動(dòng)物模型，選用昆明小鼠105只，雌雄各半，體重(20±2)g，隨機(jī)分為7組，分別為：正常對(duì)照組(A組)、模型組(B組)、枳術(shù)丸大劑量組(C組)、中劑量組(D組)、小劑量組(E組)、便秘通組(F組)、蒸餾水組(G組)。 第1天～7天，造模組用番瀉葉水浸液按0.8ml/d灌胃，正常飲食飲水，造成脾虛模型。第8天～15天，第8天起停用番瀉葉，采用饑飽失常方法延續(xù)脾虛狀態(tài)。隔天喂低纖維飼料生大米4～

3、8g，每天自由飲水1次，每次0.5h，結(jié)合限水法造成脾虛便秘模型。造模完成后，各治療組分別給藥治療，連續(xù)7天。觀察各組小鼠一般情況、體重和大便的改變；用炭末推進(jìn)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)腸道推進(jìn)功能；采用比色分析法測(cè)定各組小鼠血清 D-木糖含量；應(yīng)用 HE 染色觀察結(jié)腸病理改變；分別應(yīng)用抗 SP、VIP、nNOS(神經(jīng)型一氧化氮合酶)、Cajal 間質(zhì)細(xì)胞 c-kit抗體進(jìn)行免疫組化染色；結(jié)果應(yīng)用顯微鏡細(xì)胞計(jì)數(shù)和彩色病理圖象分析系統(tǒng)分析各組小鼠結(jié)腸 SP

4、、VIP、NO 和 ICC 的表達(dá)情況；用放射免疫法觀察血漿中 SP、VIP 水平的改變；用 SPSS13.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 【結(jié)果】 1．模型組小鼠體重明顯低于正常對(duì)照組，各治療組均能夠增加脾虛便秘小鼠的體重，與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。 2．腸道推進(jìn)功能：與正常對(duì)照組比較，模型組小鼠腸道推進(jìn)率明顯降低(P<0.01)，枳術(shù)丸大、中劑量組的腸道推進(jìn)率明顯高于模型組和蒸餾水組，差異均有統(tǒng)

5、計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，枳術(shù)丸小劑量組和便秘通組與模型組比較也有一定的差異(P<0,05)。 3.血清D-木糖含量：模型組和蒸餾水組與正常對(duì)照組比較血清 D-木糖含量顯著降低，各治療組血清 D-木糖含量與模型組和蒸餾水組比較均明顯增高(P<0.05)。 4.SP、VIP、nNOS 和 Cajial間質(zhì)細(xì)胞 c-kit免疫組織化學(xué)半定量分析結(jié)果：模型組和蒸餾水組 SP、VIP、nNOS 和 Cajal 間質(zhì)細(xì)胞c-kit

6、的表達(dá)較正常對(duì)照組比較均有顯著的差異(P<0.01)，治療后枳術(shù)丸大、中劑量組恢復(fù)接近正常水平，與模型組及蒸餾水組比較均有顯著的差異(P<0.01)。枳術(shù)丸小劑量組和便秘通組雖然具有一定的改善作用，但仍未恢復(fù)到正常水平，與模型組和蒸餾水組比較有一定差異(P<0.05)。 5．血漿中 SP、VIP 放射免疫分析結(jié)果：模型組和蒸餾水組血漿SP、VIP 水平較正常對(duì)照組和枳術(shù)丸大、中劑量組均明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與枳術(shù)丸小劑量組