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文檔簡介
1、目的:檢測nNOS與其受體蛋白NIDD、CAPON在大鼠顳骨內段面神經缺血損傷模型中的動態(tài)表達變化,探討其在面神經運動神經元損傷中的表達意義。
方法:1.建立大鼠顳骨內段面神經巖動脈缺血損傷模型:采用SD雄性大鼠建立面神經顳骨內段面神經巖動脈缺血損傷模型,均行左側手術。2.動物分組及取材:采用35只SD雄性大鼠進行試驗,隨機分為假手術組(Sham)5只、損傷組(PAI)25只、正常對照組(NC)5只。損傷組分為5個亞組:損傷后
2、1d組(1 d)、損傷后3d組(3 d)、損傷后7d組(7 d)、損傷后14d組(14d)和損傷后21d組(21d),每組5只,建立顳骨內段面神經巖動脈缺血損傷模型,均行左側手術。假手術組和正常對照組均在術后7d提取面神經核團。3.檢測指標:用RT-PCR技術測定各組中面神經元nNOS和NIDD在mRNA水平的動態(tài)表達變化;用WB技術測定各組中面神經元nNOS和CAPON在蛋白水平的動態(tài)表達變化。
結果:1.RT-PCR結果顯
3、示,NC組和Sham組比較,nNOS表達水平未見明顯差異(P>0.05);nNOS mRNA在面神經核的表達,相對于Sham組,術后1d組及3d組的表達均明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),隨后降低至正常水平。2.RT-PCR分析表明, NC組和Sham組比較,NIDD表達水平未見明顯差異(P>0.05);NIDD mRNA在面神經核的表達,相對于Sham組,NIDD mRNA表達僅在7d時有顯著增加,差異具有統(tǒng)計學意義(P<
4、0.05);其他各組均接近正常水平。3.WB結果顯示,NC組和Sham組比較,nNOS蛋白表達水平未見明顯差異(P>0.05);nNOS蛋白在面神經核的表達,相對于Sham組,術后1d組及3d組的表達均明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),其余各組與Sham組比較,差異不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05)。4.WB分析表明,NC組和Sham組比較,CAPON表達水平未見明顯差異(P>0.05); CAPON蛋白在面神經核的表達,相對
5、于Sham組,CAPON蛋白表達在術后1d時有顯著增加并達到高峰,并持續(xù)高表達,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
結論:1.面神經缺血損傷后,nNOS在面神經元中的表達呈現(xiàn)出早期急劇升高隨后降低的動態(tài)趨勢,提示nNOS在面神經缺血早期過度表達,誘導面神經元繼發(fā)損傷和死亡;中晚期保持正常水平,參與神經元再生和修復。2.面神經損傷后,NIDD在面神經核團中的表達升高在nNOS的表達高峰后一過性出現(xiàn),提示NIDD表達與nNOS表
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