“肝脾”為核心干預高催乳激素血癥大鼠卵巢顆粒細胞凋亡機制初探.pdf

1、目的:本研究通過十組模型組比較及逍遙散湯劑與顆粒劑比較，以制備成熟高催乳激素血癥大鼠模型及適宜藥物劑型，為探討“肝脾為核心靶向干預高催乳激素血癥模型動物卵巢顆粒細胞凋亡機制”奠定基礎(chǔ)。同時，對高催乳激素血癥的作用機制及靶點提供新的理論依據(jù)，并提出一個新的治療方法和安全有效的方藥，為中醫(yī)藥對女性疑難病癥的治療提供一個科學的依據(jù)。
　　 方法:十種高催乳激素血癥動物模型初篩:隨機分為正?？瞻捉M;胃復安1組;胃復安2組;胃復安3組;舒

2、必利針1組;舒必利針2組;乙烯雌酚針組;乙烯雌酚片組;氟哌啶醇組;垂體1組;垂體2組;除正?？瞻捉M外，并分別給予相應造模處理。初篩后，再次五種HPRL動物模型篩選。造模結(jié)束后將大鼠處死，取血及卵巢，采用放免法及酶聯(lián)免疫法測血清泌乳素水平及HE染色觀察卵巢組織形態(tài)學改變。
　　 加味逍遙散湯劑與顆粒劑比較:在成熟動物模型成功制備后隨機分為正常空白組;陰性對照組;加味逍遙散中劑量顆粒組;加味逍遙散中劑量湯劑組;除正?？瞻捉M外，并分別

3、予以治療，治療結(jié)束后將大鼠處死，取血及卵巢，采用放免法及酶聯(lián)免疫法測血清泌乳素水平及HE染色觀察卵巢組織形態(tài)學改變。
　　 卵巢顆粒細胞凋亡機制研究:在成熟動物模型成功制備及藥物制劑研究后隨機分為正常空白組;陰性對照組;加味逍遙散高、中、低劑量組;溴隱亭組;除正?？瞻捉M外，并分別予以治療，治療結(jié)束后將大鼠處死，取血及卵巢，采用放免法及酶聯(lián)免疫法測血清泌乳素水平，采用HE染色觀察卵巢卵泡形態(tài)學改變，通過免疫組化法檢測bax、bcl

4、-2表達差異觀察各組卵巢顆粒細胞凋亡情況。
　　 結(jié)果:十種HPRL動物模型初篩及再次五種動物模型篩選:與正?？瞻捉M血清催乳素比較，胃復安1組、2組、3組血清催乳素明顯升高(P＜0.01)，垂體1組、2組血清催乳素升高(P＜0.05)，余下各造模組血清催乳素均有升高趨勢;與正?？瞻捉M卵泡發(fā)育情況比較，胃復安3組造模組各級卵泡總數(shù)明顯下降、閉鎖卵泡數(shù)明顯增加、閉鎖卵泡/總卵泡明顯增加、最大卵泡直徑明顯減小。
　　 加味逍遙

5、散湯劑與顆粒劑比較:與正常空白組比較，加味逍遙散湯劑與顆粒劑均能有效的促進卵泡發(fā)育、減低催乳素水平的作用;從促卵泡發(fā)育及降催乳素比較，兩種劑型無差異。
　　 卵巢顆粒細胞凋亡通路的研究:與正?？瞻捉M相比，陰性對照組泌乳素水平明顯升高;各治療組可降低泌乳素水平，可有效改善卵泡發(fā)育。加味逍遙散可使卵巢顆粒細胞bcl-2表達明顯增強，Bax表達減弱，Bcl-2/Bax比例增加，從而抑制卵巢細胞凋亡。
　　 結(jié)論:胃復安3組血清