鎘對(duì)小鼠卵巢顆粒細(xì)胞凋亡作用及相關(guān)影響因素的研究.pdf

1、鎘是常見(jiàn)的環(huán)境和工業(yè)污染物，對(duì)雌性哺乳動(dòng)物生殖系統(tǒng)具有明顯的毒性。可引起卵巢病理組織學(xué)改變，干擾排卵和受精過(guò)程，引起暫時(shí)性不育，還可能對(duì)雌激素受體、孕酮受體及基因表達(dá)產(chǎn)生影響。 研究目的：探討鎘對(duì)卵巢顆粒細(xì)胞的調(diào)亡誘導(dǎo)作用，闡明其作用機(jī)理；在理論上對(duì)鎘的性腺毒性作用給予補(bǔ)充，為今后的研究提供理論依據(jù)。 研究方法：該實(shí)驗(yàn)采用25日齡未成年雌性小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，通過(guò)孕馬血清促性腺激素處理后再腹腔注射氯化鎘的在體實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，采用?/p>

2、理學(xué)方法檢測(cè)卵巢中卵泡閉鎖的變化；用TUNEL法來(lái)檢測(cè)卵巢顆粒細(xì)胞是否調(diào)亡及凋亡率的變化；用常規(guī)方法檢測(cè)顆粒細(xì)胞中MDA含量及SOD活性的變化；用免疫組化方法和半定量RT-PCR法檢測(cè)顆粒細(xì)胞p53基因的表達(dá)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：TUNEL法檢測(cè)結(jié)果為，48h對(duì)照組凋亡率為0.5426％；高、中、低劑量組分別為14.5248％、11.5764％、9.8762％；96h對(duì)照組凋亡率上升為10.2064％，高、中、低各組分別為21.4126

3、％、15.8864％、12.4721％。表明各組均有不同程度的凋亡，且隨鎘劑量增加，凋亡率有上升趨勢(shì)，差異有極顯著性(P<0.01)。病理學(xué)檢測(cè)卵巢切片中卵泡閉鎖情況，結(jié)果隨鎘劑量的增加，卵泡閉鎖率逐漸升高，差異有顯著性。常規(guī)方法檢測(cè)MDA含量和SOD活性的變化，MDA含量隨著鎘劑量的增加而升高，48h與96h兩時(shí)間段實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組差異極顯著(P<0.01)：SOD活性隨著鎘劑量的增加而相應(yīng)降低，48h各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較差異顯著，96

4、h除1mg/kg與對(duì)照組差異顯著(P<0.05)外，其余各組與對(duì)照組差異極顯著(P<0.01)。用免疫組化法和半定量RT-PCR法檢測(cè)p53蛋白表達(dá)，結(jié)果p53在各組普遍表達(dá)，并隨鎘劑量的加大而表達(dá)增強(qiáng)，除了用免疫組化法檢測(cè)時(shí)，96hlmg/kg組與對(duì)照組差異顯著外，其余各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組間差異極顯著(P<0.01)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)論： 1.鎘對(duì)小鼠卵巢顆粒細(xì)胞的凋亡有促進(jìn)作用，具有劑量效應(yīng)關(guān)系。 2.鎘對(duì)小鼠卵巢卵泡的