SIRT1在豬卵巢顆粒細胞凋亡過程中的作用研究.pdf

1、卵泡閉鎖是雌性哺乳動物卵巢內普遍存在的生理現(xiàn)象，卵巢內的卵泡除少數(shù)能成熟排卵外，大多數(shù)的卵泡在生長發(fā)育過程中經(jīng)歷閉鎖退化。在母豬這樣的多胎動物中，卵泡閉鎖調控影響其排卵率及產仔數(shù)，因此卵泡閉鎖調控的研究具有重要的生產意義及經(jīng)濟價值。卵泡閉鎖是一個受內分泌調控的極其復雜的生理過程;其主要機制是顆粒細胞凋亡。SIRT1(The Silent Information Regulator1)是組蛋白去乙?；?HistoneDeacetylas

2、e，HDAC)第三類成員之一，廣泛存在于動物細胞中，在基因沉默、細胞周期調節(jié)、脂肪酸代謝等諸多細胞活動中發(fā)揮作用;且SIRT1在細胞凋亡中發(fā)揮重要的調控作用，其作用機理也正被一步步的報道闡述。根據(jù)國內外的相關報道，本研究針對SIRT1在豬卵巢顆粒細胞凋亡中的作用進行探討，為探索卵泡閉鎖調控機制的研究提供依據(jù)。
　　 本研究選用母豬卵巢作為試驗材料，一方面利用免疫組織化學檢測SIRT1在母豬卵巢中的表達;分別分析卵巢不同細胞、不同

3、發(fā)育階段卵泡及不同閉鎖程度卵泡中SIRT1的表達;并用熒光定量法檢測不同發(fā)育階段及不同閉鎖程度的卵泡中SIRT1的表達情況。另一方面利用體外培養(yǎng)豬卵巢顆粒細胞，分別用SIRT1的激活劑(RES)、抑制劑（NAM）處理培養(yǎng)的豬卵巢顆粒細胞，不含血清的培養(yǎng)基誘導細胞凋亡，用流式細胞儀檢測不同處理組的細胞凋亡情況;用MTT法檢測不同處理組的細胞增殖情況。
　　 本論文研究結果及結論如下:
　　 SIRT1在豬卵巢卵母細胞、顆粒

4、細胞、膜細胞、黃體細胞中均檢測到表達，其中顆粒細胞中的表達豐度顯著高于膜細胞;部分黃體細胞中檢測到SIRT1的表達;在間質細胞中幾乎不表達;且SIRT1在卵巢組織細胞中的亞細胞定位為細胞核。
　　 SIRT1在豬卵巢不同發(fā)育階段卵泡中的表達呈現(xiàn)差異性;在3～1.5mm卵泡中的表達量最高，隨著卵泡的繼續(xù)發(fā)育表達量下降;并且在閉鎖卵泡中的表達高于健康卵泡，暗示SIRT1在顆粒細胞凋亡中起重要作用。
　　 用體外培養(yǎng)顆粒細胞進