人胚血管平滑肌細胞的培養(yǎng)及其與三維可降解乳酸與羥基乙酸共聚物(PLGA)細胞支架的親和性實驗.pdf

1、組織工程學(xué)[1,2]的興起為人類修復(fù)器官缺損帶來了新希望,改變了以往“以創(chuàng)傷修復(fù)創(chuàng)傷”的傳統(tǒng)治療模式。不同領(lǐng)域的專家參與到這個新興具有革命意義的研究領(lǐng)域來。作為一種再生治療方式,組織工程能夠避免如器官移植所帶來的捐贈短缺以及持久的免疫排斥等問題。組織工程作為21世紀的一種新的組織再生治療方式正受到越來越廣泛的重視。
　　種子細胞、支架材料、細胞和材料的復(fù)合構(gòu)成了組織工程的三大要素[3]。平滑肌細胞是構(gòu)成人體管狀組織(如膽管、血管、

2、輸尿管等)的重要成分。本研究通過組織塊培養(yǎng)法成功培養(yǎng)人胚 VSMCs,并種植在可降解生物材料PLGA細胞支架(膜材和三維多孔材料上)上,考察人胚VSMCs與PLGA的細胞親和性及生長情況,以期探討用可降解支架材料PLGA進行構(gòu)建組織工程化膽管的可能。
　　第一部分
　　目的:為膽管組織工程的實驗研究提供細胞來源,探索人胚VSMCs體外培養(yǎng)和保存方法。方法:從人工流產(chǎn)的胎兒主動脈分離動脈中膜平滑肌組織,應(yīng)用組織塊培養(yǎng)方法進行人

3、胚 VSMCs培養(yǎng),完成鑒定工作;并將第四代的人胚VSMCs凍存,凍存2周、1個月、2個月、3個月將細胞復(fù)蘇,觀察復(fù)蘇后人胚 VSMCs的生長情況。結(jié)果:人胚VSMCs經(jīng)鑒定為人胚平滑肌細胞,培養(yǎng)的人 VSMCs經(jīng)冷凍保存,復(fù)蘇率超過80％。結(jié)論:人胚VSMCs體外培養(yǎng)及凍存復(fù)蘇成功,使人胚VSMCs培養(yǎng)體系更加完善,為組織工程化膽管及心血管疾病藥物的研究提供豐富的細胞來源。
　　第二部分
　　目的:探索體外培養(yǎng)的人胚 VS

4、MCs與經(jīng)過改性的乳酸與羥基乙酸共聚物的親和性及細胞在 PLGA上的生長情況。方法:成功培養(yǎng)人胚VSMCs后,將其與 PLGA(膜材和三維材料)三維培養(yǎng),通過倒置顯微鏡、掃描電鏡和 MTT法觀察細胞的生長情況。結(jié)果:體外培養(yǎng)的人胚VSMCs生長旺盛,且其與改性后的PLGA具有良好的相容性,細胞在PLGA上生長良好。結(jié)果:改性后的PLGA與體外培養(yǎng)的人胚VSMCs有良好的相容性,為構(gòu)建結(jié)構(gòu)與功能與在體膽管平滑肌層相似的組織,最終形成組織工