裸鼠原位肝癌耐藥模型的建立、影像學檢測和mdrl-cDNA的全克隆及pc-MDR1質(zhì)粒的構(gòu)建.pdf

1、華中科技大學同濟醫(yī)學院博士學位論文裸鼠原位肝癌耐藥模型的建立、影像學檢測和mdrlcDNA的全克隆及pcMDR1質(zhì)粒的構(gòu)建姓名：韓宇申請學位級別：博士專業(yè)：普通外科指導教師：陳孝平2002.5.1華中科技大學同濟醫(yī)學院博士論文導時間又進一步縮短至14天，另一方面為研究mdrl基因的調(diào)控奠定了很好的基礎。裸鼠原位肝癌耐藥模型的建立目的建立裸鼠原位肝癌耐藥模型，通過腹腔間歇化療誘導腫瘤產(chǎn)生耐藥。方法培養(yǎng)肝癌細胞系HepG2，建立裸鼠的皮下腫

2、瘤模型，形成“供瘤鼠”。開腹直視下將瘤塊種植于裸鼠的肝包膜下建立原位肝癌模型，通過表阿霉素間歇腹腔化療，建立裸鼠原位肝癌耐藥模型。用體檢、B超、CT、剖腹探查監(jiān)測肝內(nèi)瘤塊生長情況。用逆轉(zhuǎn)錄聚和酶鏈反應(RT—PCR)和單克隆抗體為JSB1的鏈霉親和素生物素技術(shù)(SP法)檢測腫瘤耐藥基因mdrlmRNA和P—gp蛋白的表達。結(jié)果1模型建立手術(shù)死亡率為0％(0／25)，腫瘤生長潛伏期為5～7天，裸鼠荷瘤生存期為4914天，術(shù)后轉(zhuǎn)移率10％(

3、2／20)。種植成瘤率為90％(22／25)，補種成瘤率為100％(3／3)，耐藥誘導成功率為80％(16／20)。2誘導組mdrlmRNA和P—gP蛋白的表達均明顯高于對照組，分別是對照組的23倍和13倍。結(jié)論成功地建立了與臨床肝癌相似的裸鼠原位肝癌耐藥模型，誘導時間由經(jīng)典方法的6個月縮短至2個月，并且是在體內(nèi)肝原位誘導腫瘤逐步耐藥，更好的模擬了臨床腫瘤獲得性耐藥的產(chǎn)生過程。為進一步研究肝癌多藥耐藥基因的診斷和逆轉(zhuǎn)提供了良好的動物平臺