STAT3作為一種新的肺腫瘤標(biāo)志物的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:檢測(cè)信號(hào)傳導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄活化因子3(signal transducer and activatorof transcription3,STAT3)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、糖類抗原125(carbohydrate antigen125,CA125)在人肺腺癌細(xì)胞A549和正常人胚肺細(xì)胞MRC-5中的表達(dá),分析三者在人肺腺癌細(xì)胞A549中的相互關(guān)系,探討STAT3對(duì)肺腺癌早期診斷的價(jià)值及能否成

2、為一種新的肺腫瘤標(biāo)志物。
　　 方法:1、采用電化學(xué)發(fā)光免疫法(ECLIA)檢測(cè)人肺腺癌細(xì)胞A549和正常人胚肺細(xì)胞MRC-5培養(yǎng)3天的培養(yǎng)液中CEA、CA125的表達(dá)水平。2、采用免疫組織化學(xué)PV法檢測(cè)人肺腺癌細(xì)胞A549和正常人胚肺細(xì)胞MRC-5中STAT3、CEA、CA125蛋白表達(dá)。采集圖像,利用IPP(Image-Pro Plus)6.0圖像分析軟件分析圖像,通過(guò)測(cè)圖像MOD(mean optical density,

3、平均光密度)值判斷圖片染色強(qiáng)度。并分析在人肺腺癌細(xì)胞A549中STAT3蛋白分別與CEA、CA125蛋白表達(dá)的相關(guān)性。3、采用熒光定量PCR法檢測(cè)人肺腺癌細(xì)胞A549和正常人胚肺細(xì)胞MRC-5中STAT3 mRNA、CEA mRNA、CA125mRNA的相對(duì)表達(dá)量,分析人肺腺癌細(xì)胞A549中STAT3 mRNA分別與CEA mRNA、CA125 mRNA表達(dá)的相關(guān)性。
　　 結(jié)果:1、電化學(xué)發(fā)光免疫法結(jié)果:CEA、CA125在人

4、肺腺癌細(xì)胞A549培養(yǎng)液中的表達(dá)水平明顯高于它們各自在正常人胚肺細(xì)胞MRC-5培養(yǎng)液中的表達(dá),經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,它們各自在兩組細(xì)胞中的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；2、免疫組織化學(xué)染色圖像分析結(jié)果:(1)STAT3蛋白、CEA蛋白、CA125蛋白在人肺腺癌細(xì)胞A549中的表達(dá)水平均明顯高于它們各自在正常人胚肺細(xì)胞MRC-5中的表達(dá),經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,它們各自在兩組細(xì)胞中的表達(dá)差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。(2)STAT3蛋白與C

5、EA蛋白在人肺腺癌細(xì)胞A549中的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.560,P=0.01,P<0.05)。(3)STAT3蛋白與CA125蛋白在人肺腺癌細(xì)胞A549中的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.721,P=0.000,P<0.01)；3、熒光定量PCR技術(shù)結(jié)果顯示:(1)STAT3、CEA、CA125和GAPDH擴(kuò)增產(chǎn)物特異；擴(kuò)增效率分別為96.97％、98.71％、95.17和％96.76％。(2)STAT3 mRNA、CEAmRNA、CA125 m

6、RNA在人肺腺癌細(xì)胞A549中的表達(dá)水平均明顯高于它們各自在正常人胚肺細(xì)胞MRC-5中的表達(dá),經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,它們各自在兩組細(xì)胞中的表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(2)STAT3mRNA與CEA mRNA在人肺腺癌細(xì)胞A549中的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.521,P=0.047,P<0.05)。(3)STAT3 mRNA與CA125 mRNA在人肺腺癌細(xì)胞A549中的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.814,P=0.000,P<0.01)。