肺腺癌中Fas、HDAC1的表達(dá)與組蛋白乙酰化水平的相關(guān)性研究.pdf

1、背景與目的：肺癌是目前對人類威脅最大的腫瘤，根據(jù)最新統(tǒng)計(jì)結(jié)果可知，其死亡率居腫瘤之首，而在我國，情況更加突出，發(fā)病率和死亡率均居第一。而肺腺癌約占原發(fā)性肺癌的30％。面對這人類的第一大殺手，我們并非坐以待斃，而是通過各種方法，從多方面進(jìn)行研究，企圖找尋有力武器。目前治療手段主要有：外科切除、放療、化療，鑒于手術(shù)的創(chuàng)傷大，放化療效果差、毒性和費(fèi)用高，且不適合許多晚期病人，使得肺癌生存率已至平臺(tái)期。故探討肺癌發(fā)生、發(fā)展的分子生物學(xué)機(jī)制，尋找

2、新治療途徑，提高生存率之任務(wù)迫在眉睫。目前最熱門且最具潛力的研究當(dāng)屬表觀遺傳學(xué)修飾和細(xì)胞凋亡兩方面。而此二者單獨(dú)研究較多，但二者相結(jié)合并探討其相互關(guān)系之研究尚少。凋亡途徑中最為重要的是Fas系統(tǒng)；而表觀遺傳學(xué)修飾中以組蛋白的乙?；癁橹?，其中又以HDACs家族蛋白的表達(dá)作為切入點(diǎn)為多。
　　Fas(又稱CD95、APO-1或TNFRSF6)及其配體FasL(又稱CD178、CD95L或TNFSF6)組成的Fas系統(tǒng)是介導(dǎo)哺乳動(dòng)物細(xì)胞

3、凋亡的重要調(diào)節(jié)機(jī)制。在諸多生物學(xué)行為中發(fā)揮重要作用。該系統(tǒng)一旦失衡，將引起正常的細(xì)胞凋亡程序受阻，導(dǎo)致組織惡性增生或腫瘤免疫逃逸。組蛋白乙?；?Histone acetyltransferases，HATs)和組蛋白去乙酰化酶(His'tone deacetylases，HDACs)共同調(diào)節(jié)組蛋白乙?；癄顟B(tài)。染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)和基因的表達(dá)被HATs和HDACs之間的動(dòng)態(tài)平衡控制，因此它們的功能紊亂是腫瘤發(fā)生、發(fā)展的重要分子機(jī)制。
　　

4、那么腫瘤組織中Fas系統(tǒng)、HDACs的表達(dá)與正常組織中有何不同，它們與組蛋白的乙?；街g是否存在某種聯(lián)系，甚至相互作用呢？本課題通過檢測肺腺癌及癌旁組織中Fas、HDAC1蛋白的表達(dá)情況及組蛋白乙酰化的水平，初步探討它們與肺腺癌的關(guān)系并分析它們之間的相互關(guān)系。為進(jìn)一步觀察肺腺癌細(xì)胞增殖、凋亡和周期的變化奠定基礎(chǔ)，更為探尋肺腺癌的發(fā)病機(jī)制，從而為其治療提供新的依據(jù)。
　　材料和方法：收集經(jīng)外科手術(shù)切除的肺腺癌患者癌組織及癌旁正常

5、組織（距腫瘤>5cm）各50例，其中男性23例，女性27例，年齡（46-75）歲，平均（62.96±6.5）歲；轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)28例，非轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)22例；良性病變患者肺組織（正常肺組織）30例，其中男性18例，女性12例，年齡（18-71）歲，平均（47.53±13）歲；其中肺結(jié)核球10例，炎性假瘤12例，肺大皰8例。癌旁正常組織與正常肺組織設(shè)為對照組。采用免疫組化染色法和Western blotting技術(shù)檢測50例肺腺癌組織和癌旁正常組

6、織及30例正常肺組織中Fas、HDAC1蛋白的表達(dá)情況和組蛋白H3、H4的乙?；?。免疫組化明確Fas、HDAC1蛋白表達(dá)的位置。
　　結(jié)果：1.肺腺癌組織中Fas、HDAC1、A-H3、A-H4蛋白表達(dá)的陽性率分別為34.0％(17/50)、62.0％(31/50)、36.0%（18/50）、38.0%（19/50）；癌旁組織中Fas、HDAC1、A-H3、A-H4蛋白表達(dá)的陽性率分別為76.0％(38/50)、36.0％(1

7、8/50)、74.0%（37/50）、72.0%(36/50)；正常肺組織中Fas、HDAC1、A-H3、A-H4蛋白表達(dá)的陽性率分別為83.0％(25/30)、30.0％(9/30)、76.6%（23/30）、80.0%(24/30)。癌組織分別與癌旁組織和正常肺組織比較p<0.05。癌旁組織和正常肺組織比較p>0.05。2.轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中Fas、HDAC1、A-H3、A-H4蛋白表達(dá)的陽性率分別為33.3％(9/27)、70.4％(1

8、9/27)、29.6%（8/27）、37.0%（10/27）；非轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中Fas、HDAC1、A-H3、A-H4蛋白表達(dá)的陽性率分別為56.5％(13/23)、34.7％(9/23)、60.8%（14/23）、65.2%（15/23）；兩組組間進(jìn)行比較p<0.05。3.高分化腺癌中Fas、HDAC1、A-H3、A-H4蛋白表達(dá)的陽性率分別為41.2%（7/17）、52.9%（9/17）、47.1%（8/17）、52.9%（9/17）；

9、中分化腺癌中Fas、HDAC1、A-H3、A-H4蛋白表達(dá)的陽性率分別為33.3%（6/18）、66.6%（11/18）、33.3%（6/18）、38.8%（7/18）；低分化腺癌中Fas蛋白表達(dá)的陽性率分別為26.6%（4/15）、73.3%（11/15）、26.6%（4/15）、20.0%（3/15）。各組間進(jìn)行比較，低分化組分別與中、高分化組進(jìn)行比較P<0.05；中、高分化組間比較p>0.05。4.肺腺癌中Fas、HDAC1、A-

10、H3、A-H4蛋白的表達(dá)在不同性別、年齡、淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移、腫瘤的部位、吸煙指數(shù)、TNM分期中差異比較p>0.05。5.肺腺癌中Fas表達(dá)與A-H3、A-H4表達(dá)的相關(guān)系數(shù)分別為r=0.382（p<0.01）、r=0.390（p<0.01），呈正相關(guān)；HDAC1表達(dá)與A-H3、A-H4表達(dá)的相關(guān)系數(shù)分別為r=-0.411（p<0.01）、r=-0.429（p<0.01），呈負(fù)相關(guān)；HDAC1表達(dá)與Fas表達(dá)的相關(guān)系數(shù)為r=-0.331（p