免疫親和凈化-高效液相色譜法測(cè)定糧食中鐮刀菌毒素分析方法的研究.pdf

1、嘔吐毒素和T-2毒素是不同類型鐮刀菌毒素的典型代表，它們廣泛的存在于小麥、大麥、玉米等谷物之中，是污染糧食的主要真菌性毒素。真菌毒素存在的廣泛性、劇烈的影響以及潛在的致癌性使得對(duì)于可能存在污染的主要食品和相關(guān)產(chǎn)品必須制定最大允許限量的強(qiáng)制標(biāo)準(zhǔn)。因此，目前我國(guó)急需建立一個(gè)快速、準(zhǔn)確、靈敏的毒素檢測(cè)方法。本課題主要采用目前國(guó)際先進(jìn)的免疫親和技術(shù)等前處理手段，以HPLC法為測(cè)定方法，建立簡(jiǎn)便易行，靈敏可靠的快速、準(zhǔn)確定性、定量谷物中嘔吐毒素(

2、DON)和T-2毒素的高效液相色譜檢測(cè)和質(zhì)譜確證方法。 嘔吐毒素方法為：樣品用水提取，提取物通過免疫親和柱進(jìn)行富集和凈化，以C18柱為分離柱，乙腈+水(1+9)混合溶劑為流動(dòng)相進(jìn)行高效液相色譜分離和檢測(cè)，利用大氣壓化學(xué)電離質(zhì)譜(APCI)進(jìn)行陽性結(jié)果的鑒定和確認(rèn)。在小麥、大麥等樣品中，本方法在0.1-10ug/g添加范圍內(nèi)的回收率大于80％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于0.03，檢出限為0.1ug/g。 T-2毒素方法為：樣品用甲醇

3、+水(8+2)混合溶劑進(jìn)行提取，提取物通過免疫親和柱進(jìn)行凈化，凈化后的毒素與1-AN和DMAP進(jìn)行衍生化反應(yīng)，以C18柱為分離柱，乙腈+水(8+2)混合溶劑為流動(dòng)相，熒光檢測(cè)器(激發(fā)波長(zhǎng)381nm，發(fā)射波長(zhǎng)470nm)進(jìn)行高效液相色譜分離和檢測(cè)，利用大氣壓化學(xué)電離質(zhì)譜(APCI)進(jìn)行陽性結(jié)果的鑒定和確認(rèn)。在小麥、大麥、大米、玉米等樣品中，本方法在0.05-1.5ug/g添加范圍內(nèi)的回收率大于85％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2.2，檢出限為0.0