人參-牡丹皮抗腦缺血功效成分組的制備工藝及含量測(cè)定研究.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)通過優(yōu)選出人參、牡丹皮抗缺血性中風(fēng)的有效部位（人參總皂苷、丹皮酚和牡丹皮總苷）的最佳提取工藝，將有效部位配伍制成功效成分組，測(cè)定成分組中多種有效成分的含量，為今后人參和牡丹皮抗缺血性中風(fēng)的有效部位的開發(fā)研究奠定一定的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　方法：1.以人參皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd為指標(biāo)，用HPLC法對(duì)13批次的人參藥材進(jìn)行含量測(cè)定；以芍藥苷和丹皮酚為指標(biāo)，用 HPLC法對(duì)12批次的牡丹皮藥材進(jìn)行含量測(cè)定，從中篩選出實(shí)驗(yàn)用

2、藥。
　　2.以水和70％乙醇為提取溶劑來優(yōu)選人參皂苷的提取溶媒。
　　3.以乙醇濃度、加醇量、提取時(shí)間、提取次數(shù)4個(gè)主要影響因素，每個(gè)因素3個(gè)水平，設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)表，以人參皂苷Rg1、Re、Rb1為考察指標(biāo)，HPLC法測(cè)定人參皂苷含量，來優(yōu)選人參的最佳提取工藝，并進(jìn)行工藝驗(yàn)證。
　　4.采用水蒸氣蒸餾法提取丹皮酚。提取丹皮酚后的蒸餾母液濾除之后，藥渣再用乙醇加熱回流，繼續(xù)提取牡丹皮總苷，醇提液回收乙醇至無醇味后和蒸餾母

3、液合并作為牡丹皮總苷提取液。
　　5.人參皂苷、牡丹皮總苷提取液離心后用大孔吸附樹脂進(jìn)行分離純化，精制后的人參皂苷、牡丹皮總苷提取物用 HPLC法進(jìn)行含量測(cè)定，其中人參皂苷的測(cè)定以人參皂苷 Rg1、Re、Rb1、Rd為指標(biāo)，牡丹皮總苷的含量測(cè)定以芍藥苷為指標(biāo)。
　　6.將得到的人參皂苷、丹皮酚和牡丹皮總苷按照一定比例進(jìn)行配伍，制備成人參-牡丹皮功效成分組。
　　7.建立可以同時(shí)測(cè)定功效成分組中人參皂苷 Rg1、Re、R

4、b1、Rd、丹皮酚和芍藥苷等成分含量的HPLC法，并進(jìn)行相應(yīng)的方法學(xué)考察，測(cè)定3批人參-牡丹皮功效成分組中6種主要有效成分的含量。
　　結(jié)果：1.13批次的人參藥材含量測(cè)定結(jié)果均滿足藥典對(duì)人參皂苷Rg1和Re的總量不得少于0.30%、人參皂苷Rb1不得少于0.20%的要求；12批次的牡丹皮藥材均滿足藥典中對(duì)丹皮酚不少于1.2%的要求。以上均為合格藥材，本文選擇01人參藥材和01牡丹皮藥材（均購(gòu)自河南禹州藥材批發(fā)市場(chǎng)）作為本試驗(yàn)用藥

5、資源。
　　2.實(shí)驗(yàn)中通過比較發(fā)現(xiàn)：以乙醇為溶媒提取人參皂苷的得率比水提取的得率高。
　　3.通過正交試驗(yàn)優(yōu)選出的人參最佳提取工藝為：加6倍量70%乙醇，提取2次，每次1h。工藝驗(yàn)證證明此工藝重復(fù)性良好。
　　4.采用水蒸氣蒸餾法提取丹皮酚的轉(zhuǎn)移率達(dá)70%以上。
　　5.人參提取物中人參皂苷的得率達(dá)17%以上，滿足藥典15%～25%的要求。
　　6.人參皂苷、丹皮酚和牡丹皮總苷可按照一定比例進(jìn)行配伍，制成人

6、參-牡丹皮功效成分組。
　　7.本文所建立的HPLC法可以同時(shí)測(cè)定功效成分組中人參皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd、丹皮酚和芍藥苷的含量，可以應(yīng)用到人參-牡丹皮功效成分組的含量測(cè)定。
　　結(jié)論：確定了人參、牡丹皮有效部位的提取工藝，小樣試制結(jié)果表明，所制定的工藝簡(jiǎn)便可行，主要有效成分收率較高；建立了一種 HPLC法可以同時(shí)測(cè)定功效成分組中多種有效成分的含量，經(jīng)方法學(xué)考察證明此法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性和穩(wěn)定性較好，可以用于人參-牡丹