牡丹皮有效部位提取及抗缺血性中風(fēng)的試驗(yàn)研究.pdf

1、本研究工作主要包括以下內(nèi)容：　　1.采集不同產(chǎn)地樣品，通過理化分析，確定牡丹皮有效成分含量高的主產(chǎn)區(qū)，確定實(shí)驗(yàn)用藥材來源?！　?.牡丹皮藥材總苷組分的提取。　　3.SP-X型樹脂純化分離丹皮總苷的工藝參數(shù)考察。　　4.牡丹皮總苷組分的純化。　　5.提取、分離牡丹皮中總苷組分的含量測(cè)定?！　?.牡丹皮提取部位抗缺血性中風(fēng)的實(shí)驗(yàn)研究。　　6.1提取物不同劑量對(duì)MCAO大鼠體重影響及神經(jīng)學(xué)評(píng)價(jià)?！　?.2提取物不同劑量對(duì)MCA

2、O大鼠被動(dòng)性條件反射的影響?！　?.3提取物不同劑量對(duì)MCAO大鼠腦梗塞面積的影響。 研究方法： 1.采用乙醇加熱回流提取工藝，通過正交實(shí)驗(yàn)法考察提取次數(shù)、提取時(shí)間和溶媒用量及乙醇濃度對(duì)提取物及組分的影響，并以牡丹皮總苷中的含量較多的單體成分芍藥苷為指標(biāo)采用高效液相色譜法進(jìn)行含量測(cè)定。優(yōu)選出最佳提取條件。 2.采用大孔吸附樹脂對(duì)牡丹皮總苷組分進(jìn)行純化分離。通過篩選確定樹脂型號(hào)，并通過靜態(tài)吸附試驗(yàn)確定樹脂最大吸附

3、容量、動(dòng)態(tài)吸附試驗(yàn)確定樹脂實(shí)際最大上樣量。通過正交試驗(yàn)考察上樣濃度、樹脂型號(hào)、洗脫溶媒的醇濃度、洗脫溶媒體積對(duì)總苷組分純化的影響，以高效液相色譜法及分光光度法對(duì)工藝、純化工藝中芍藥苷含量進(jìn)行測(cè)定，通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果，對(duì)上述工藝進(jìn)行優(yōu)選。 3.應(yīng)用開顱法阻斷大腦中動(dòng)脈(MCA)建立大鼠局灶性腦缺血模型(MCAO)，研究所得牡丹皮總苷組分對(duì)大鼠腦缺血損傷引起的體重減輕、神經(jīng)功能損傷及腦組織損傷的保護(hù)作用。 研究結(jié)果： 1.

4、本課題就所掌握藥材樣品情況試驗(yàn)篩選，分別以丹皮酚和芍藥苷為指標(biāo)，對(duì)收集到的牡丹皮藥材樣品進(jìn)行含量測(cè)定，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選用安徽銅陵藥材基地產(chǎn)牡丹皮作為實(shí)驗(yàn)用藥材。 2.牡丹皮藥材乙醇提取工藝為牡丹皮加5倍體積的75％乙醇加熱回流提取3次，每次1小時(shí)。 3.經(jīng)正交試驗(yàn)篩選，選用日本三菱SP-1型大孔吸附樹脂作為牡丹皮總苷類成分純化材料。 4.牡丹皮總苷成分的提取工藝如下頁(yè)流程所示。 5.建立分光光度法對(duì)所得牡