加工前、后亳州牡丹皮的藥效學(xué)對(duì)比研究.pdf

1、目的:
　　 在時(shí)代的進(jìn)步、科技的發(fā)展下,生活節(jié)奏的加快,人們的飲食搭配發(fā)生了巨大的改變,飲食中的能量攝入量在不斷的增加,運(yùn)動(dòng)量卻在相對(duì)的減少。高血壓、高血脂、糖尿病,心肌梗死等心腦血管疾病的發(fā)病率在不斷的提高,且有逐年上升的趨勢(shì)。
　　 中藥牡丹皮在以往的研究中已經(jīng)證實(shí)對(duì)糖尿病和心肌缺血再灌注都有較好的治療效果。質(zhì)量好的藥材能有良好的治療作用,但是質(zhì)量差的藥材不但不能起到治療的作用,反而會(huì)給病痛的身體雪上加霜。目前,在

2、中藥市場(chǎng)中存在著一種不成文的做法,即中藥材在進(jìn)行炮制之后,為了能延長(zhǎng)藥材的保質(zhì)時(shí)間,大部分商家都會(huì)將炮制后的藥材再增加一道工序一用硫磺熏制。這樣的就能使藥材從外觀上既美觀又能保證藥材存放時(shí)間的長(zhǎng)久。
　　 亳州作為中國(guó)較大的中藥材批發(fā)市場(chǎng),聚集了來(lái)自全國(guó)各地的中藥材販賣(mài)的商家。根據(jù)中藥材的這一現(xiàn)狀,筆者通過(guò)在亳州購(gòu)買(mǎi)的當(dāng)?shù)胤N植的、經(jīng)硫磺熏制前、后的牡丹皮進(jìn)行研究。本文研究的主要目的是將經(jīng)硫磺熏制前、后的牡丹皮用于治療治療糖尿病和

3、心肌缺血再灌注損傷,觀察經(jīng)過(guò)硫磺熏制后對(duì)其藥效是否存在影響,且把影響的程度做一對(duì)比。通過(guò)實(shí)驗(yàn)的比較得出較為科學(xué)的證據(jù)說(shuō)明硫磺熏制這樣一道工序的作用是否有必要。
　　 方法:
　　 1、將健康的SPF級(jí)雄性昆明小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3天,用自制的高脂飼料喂養(yǎng)4周后,一次性給小鼠腹腔注射STZ溶液,造成高血糖狀態(tài),以血糖≥11.1mmol·L-1的小鼠作為Ⅱ型糖尿病模型的標(biāo)準(zhǔn)。將造模成功的小鼠隨機(jī)分成5組,分別為:正常組、模型組、二

4、甲雙胍陽(yáng)性組、加工前亳州丹皮組、加工后亳州丹皮組。正常組小鼠給予普通飼料,其余各組仍給予高脂飼料。連續(xù)給藥4周。4周后,測(cè)定各組小鼠的糖耐量。摘取小鼠眼球取血,解剖取出小鼠的心、肝、脾、肺、腎,其中一部分肝臟、腎臟制成病理切片用于作顯微觀察,并測(cè)定小鼠血清中的GLU、TC、TG、SOD、MDA和NEFA含量。
　　 2、將購(gòu)買(mǎi)的雄性Wistar大鼠適應(yīng)環(huán)境3天后隨機(jī)分為5組:正常組、模型組、假手術(shù)組、地奧心血康陽(yáng)性組、亳州丹皮組

5、,每組10只。連續(xù)灌胃14天。14天后,于末次給藥1h后稱(chēng)重,麻醉,連接Ⅱ?qū)?lián)心電圖。從頸部正中切開(kāi)皮膚,分離氣管,氣管插管,連接小動(dòng)物呼吸機(jī)進(jìn)行機(jī)械通氣。在三四肋間開(kāi)胸,切開(kāi)皮膚,鈍性分離肌肉組織,打開(kāi)胸腔,分離心包,使心臟跳出胸腔,結(jié)扎心臟左冠狀動(dòng)脈前降支,引起缺血。將心臟放回胸腔內(nèi),缺血30min后解開(kāi)結(jié)扎,繼續(xù)灌注60min。之后,剪開(kāi)腹腔,腹主動(dòng)脈取血,取大鼠的心、肝、腎,其中一部分心臟制成細(xì)胞凋亡用于作顯微觀察,并測(cè)定大鼠血

6、清中的SOD、MDA、CK、LDH、GSH和NO含量。
　　 結(jié)果:
　　 1、從灌胃給藥過(guò)程看,給予加工后亳州丹皮的小鼠死亡數(shù)目是加工前的一倍。從糖耐量結(jié)果觀察,加工前、后亳州丹皮都能降低餐后的血糖濃度,兩者之間無(wú)顯著差異。與模型組比較,加工前、后亳州丹皮組均能顯著降低Ⅱ型糖尿病小鼠的GLU、TC和MDA,并能顯著提高Ⅱ型糖尿病小鼠的SOD,雖然加工前與加工后亳州丹皮的TC、TG、SOD、MDA和NEFA不存在顯著性差

7、異,但是從恢復(fù)程度而言,加工前比加工后的丹皮效果佳。
　　 2、與模型組比較,亳州丹皮組可明顯降低血清中MDA、CK、LDH含量,升高SOD、GSH活性;亳州丹皮組血清中NO含量雖有升高,但與模型組比較無(wú)顯著性差異。HE染色結(jié)果顯示:亳州丹皮組心肌細(xì)胞較模型組排列整齊,且其他病理變化程度減輕。TUNEL染色結(jié)果顯示:與模型組比較,亳州丹皮組可降低細(xì)胞凋亡指數(shù),且具有顯著性差異。
　　 結(jié)論:
　　 1、加工后的亳

8、州丹皮在治療糖尿病方面與加工前的亳州丹皮雖不存在顯著差異性,這可能與加工后的丹皮被硫磺熏制的時(shí)間短和濃度小有關(guān)系,但從部分指標(biāo)和病理切片圖觀察的結(jié)果說(shuō)明加工后的亳州丹皮療效更佳,這仍與牡丹皮被硫磺熏制這一工序的存在有一定聯(lián)系。
　　 2、加工后的亳州丹皮對(duì)實(shí)驗(yàn)性心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)機(jī)制可能與清除氧自由基、保護(hù)氧自由基清除酶活性、增強(qiáng)缺血再灌注大鼠心肌抗氧化能力、抑制脂質(zhì)過(guò)氧化物產(chǎn)生、減輕脂質(zhì)過(guò)氧化所致心肌細(xì)胞膜的損傷有關(guān);并