瘦素對人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞CRP和PAI-1表達(dá)的影響.pdf

1、目的:觀察瘦素(Leptin，LP)對人冠脈內(nèi)皮細(xì)胞(humancoronary artery endothelial cells，HCAECs)C-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)和纖溶酶原激活物抑制劑-1(Plasminogen activator inhibitor-1，PAI-1)表達(dá)的影響，探討LP與冠脈血栓形成間的關(guān)系。
　　方法:在實(shí)驗(yàn)中使用克隆的人冠脈內(nèi)皮細(xì)胞(HCAECs)，取3-5代細(xì)胞

2、，當(dāng)細(xì)胞生長至70％-80％融合時(shí)，將細(xì)胞分為六組，每組各六個(gè)復(fù)孔，工具對照組為無內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(endothelial cellgrowth factor，ECGF)DMEM，其余五組HCEACs分別與不同濃度的瘦素(0ng/ml、20ng/ml、50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml)作用48小時(shí)，收集條件培養(yǎng)基通過酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbentassay，ELISA)測定CRP

3、和PAI-1的濃度。蛋白免疫印跡法(WesternBlot，WB)檢測細(xì)胞內(nèi)CRP和PAI-1的蛋白表達(dá)量。
　　結(jié)果:
　　(1)比較六組細(xì)胞培養(yǎng)基中CRP水平，50-200ng/ml的瘦素處理組均高于正常對照組，其誘導(dǎo)效應(yīng)隨瘦素濃度增加而增強(qiáng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.000，0.000，0.000，＜0.05）;
　　(2)比較六組細(xì)胞培養(yǎng)基中PAI-1水平，50-200ng/ml的瘦素處理組均高于正常對照組，其

4、誘導(dǎo)效應(yīng)隨瘦素濃度增加而增強(qiáng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.000，0.000，0.000，＜0.05）;
　　(3)比較六組細(xì)胞內(nèi)CRP相對表達(dá)量，50-200ng/ml的瘦素處理組均高于正常對照組，其誘導(dǎo)效應(yīng)隨瘦素濃度增加而增強(qiáng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000，0.000，0.000，＜0.05);
　　(4)比較六組細(xì)胞內(nèi)PAI-1相對表達(dá)量，50-200ng/ml的瘦素處理組均高于正常對照組，其誘導(dǎo)效應(yīng)隨瘦素濃度增加而