基于低速逆流色譜法的蘿卜籽中硫代葡萄糖苷的制備分離.pdf

1、硫代葡萄糖苷(簡稱硫苷)是廣泛存在于十字花科植物中的含硫次級化合物。近年來大量研究表明硫代葡萄糖苷的降解產(chǎn)物異硫代氰酸酯具有抗癌活性,因此對其進行分離純化具有重大的意義。由于硫代葡萄糖苷類化合物在結構上的相似性,使得該類化合物的分離純化困難。低速逆流色譜技術(SRCCC)是近年來發(fā)展起來的一種新型逆流色譜技術。目前針對其分離的研究報道還較少。本論文基于低速逆流色譜技術對蘿卜籽中的硫代葡萄糖苷進行制備型分離,為硫代葡萄糖苷的工業(yè)化生產(chǎn)打下

2、基礎。 采用甲醇沸騰提取法,通過滅酶、粉碎、浸提、萃取、濃縮干燥等操作,從30kg蘿卜籽中得到硫代葡萄糖苷粗提物3380.8g。 采用SRCCC-D1000型低速逆流色譜儀對蘿卜籽中硫代葡萄糖苷的分離進行了初探。對溶劑系統(tǒng)進行了研究,找到了合適的溶劑系統(tǒng)：正丁醇-乙腈-10％硫酸銨溶液(0.5:1:2.2)。探討了流動相流速、色譜柱轉(zhuǎn)速、進樣量等參數(shù)對固定相保留率的影響,優(yōu)化了分離條件,確定了低速逆流色譜的分離條件：流動

3、相流速3 mL/min、色譜柱轉(zhuǎn)速50 rpm、進樣量1.5 g。采用柱容量為1000 mL的SRCCC-D1000型低速逆流色譜儀分離蘿卜籽粗提物,除鹽和色素后得到化合物I為67.6 mg,此外其它部分經(jīng)制備高效液相色譜進一步純化得到化合物Ⅱ為9.3 mg和組分Ⅲ為10.4 mg。采用ESI-MS和NMR對分離得到的物質(zhì)進行了結構鑒定,化合物Ⅰ為4-甲基亞磺?；?3-丁烯基硫代葡萄糖苷,化合物Ⅱ為丙烯基硫代葡萄糖苷,組分Ⅲ為非硫苷物質(zhì)

4、。 采用浙江工商大學食品與生物工程研究所自行研制的具有世界先進水平的SRCCC-D30L型低速逆流色譜儀對蘿卜籽中硫代葡萄糖苷進行了大規(guī)模的制備分離研究。在柱容積為7L、17L、30L的條件下,依次成功的對蘿卜籽中的硫代葡萄糖苷進行了從數(shù)十克級到數(shù)百克級的制備型分離,結果表明分離效率隨著柱容量的不斷增大而增大。采用兩臺SRCCC-D30L型低速逆流色譜儀以雙機串聯(lián)的方式使其柱容量達到60L,成功的對蘿卜籽中的硫代葡萄糖苷進行了千