GPX2在食管癌中的表達及其預后意義.pdf

1、背景和目的：
　　谷胱甘肽過氧化物酶2（glutathione peroxidase2，GPX2）又稱為胃腸特異型谷胱甘肽過氧化物酶，主要表達于胃腸道，在人類還表達于食管和肝臟，其基本功能是抗氧化損傷。目前研究發(fā)現(xiàn)，GPX2在結(jié)直腸癌、Barrett’s食管、鱗狀上皮細胞致瘤性轉(zhuǎn)化、肺癌、肝癌，乳腺癌和雄激素依賴性前列腺癌等腫瘤中高表達，關于GPX2表達與腫瘤之間關系的研究方興未艾。然而，GPX2在食管癌中的表達，及其與食管癌發(fā)生

2、發(fā)展之間的關系以及在食管癌形成過程中所發(fā)揮的作用卻鮮有報道。
　　食管癌是最常見的消化道惡性腫瘤之一，在世界范圍內(nèi)，是第八大常見腫瘤，第六大癌癥致死原因。在我國，廣東省潮汕地區(qū)是食管癌高發(fā)區(qū)之一，其嚴重威脅了當?shù)鼐用竦慕】蹬c生命。本研究主要采用HE染色、免疫組織化學、細胞培養(yǎng)、Western blot和RT-PCR等實驗方法。通過檢測GPX2在正常食管粘膜上皮細胞系中的表達，探討硒對GPX2表達的影響；通過檢測GPX2和8-Ohd

3、G在食管癌和食管粘膜組織中的表達，探討GPX2與食管癌發(fā)生發(fā)展之間的關系及其在食管癌形成過程中所發(fā)揮的作用；本研究還探討了GPX2的表達對食管癌患者預后的影響。
　　材料與方法：
　　材料：
　　收集汕頭大學醫(yī)學院病理科2002年及2011-2012年間165例術前未經(jīng)放化療食管癌患者的手術標本，其中隨訪85例食管癌患者，還有70例食管癌患者手術標本配有癌旁食管粘膜組織。此70例食管癌患者手術配對標本均在腫瘤、腫瘤旁粘

4、膜(距腫瘤2厘米內(nèi))及遠端切緣粘膜（距腫瘤5厘米外）等三處取材，分別標記為Ca、P、N。故P和N組織標本共140例，除去8例賁門部位粘膜，實際統(tǒng)計為132例。
　　收集汕頭大學司法鑒定中心尸檢取材獲得的正常食管粘膜標本6例，其中取自嬰兒和成人各3例。
　　NE3正常食管上皮永生化細胞系為香港大學曹教授惠贈。
　　方法：
　　1.HE染色：觀察食管癌的組織學類型、分化程度、浸潤深度以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等情況,觀察食管癌癌

5、旁粘膜和遠端切緣粘膜組織學類型及炎癥細胞浸潤程度等情況。
　　2.免疫組化染色：采用Envision兩步法檢測食管癌、癌旁粘膜及遠端切緣粘膜中GPX2蛋白和8-OhdG的表達。
　　3.細胞培養(yǎng)：培養(yǎng)NE3正常食管粘膜上皮永生化細胞系，建立硒模型。
　　4.Western blot：檢測食管癌、癌旁粘膜及遠端切緣粘膜新鮮組織標本GPX2的表達情況。
　　5.RT-PCR：檢測食管癌、癌旁粘膜及遠端切緣粘膜新鮮組織

6、標本GPX2 mRNA的表達情況。
　　6.圖像采集：使用Leica DMRXA2全能顯微鏡和Leica IM50圖像采集系統(tǒng)對染色結(jié)果進行拍照分析。
　　7.統(tǒng)計分析：利用SPSS19.0對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，采用了?2檢驗、相關分析、Log-rank檢驗，趨勢檢驗和Cox回歸模型等方法。P值＜0.05時有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果：
　　1.炎癥等級與食管粘膜上皮異常增生之間存在正相關（P=0.000，P＜0.

7、01），Spearman相關系數(shù)r=0.640。
　　2.隨正常食管粘膜、食管上皮異常增生到食管癌的過程中，8-OhdG的表達逐漸增加。
　　3.隨硒濃度的增加，GPX2的表達明顯增加。
　　4.隨正常食管粘膜、食管上皮異常增生到食管癌的過程中，GPX2的表達逐漸增加。而在低分化型的食管癌中，GPX2呈陰性表達。
　　5.GPX2表達是食管癌患者能否長期生存的獨立影響因素，也是食管癌的死亡危險因素，GPX2陰性表