ASIC2參與胞外酸化誘導(dǎo)的樹(shù)突狀細(xì)胞IL-1β的分泌.pdf

1、目的：IL-1β是一種重要的炎性細(xì)胞因子，樹(shù)突狀細(xì)胞（DC）是其重要來(lái)源。酸敏感離子通道（ASICs）是DC感知酸化刺激的受體，細(xì)胞外微環(huán)境酸化是一種引起細(xì)胞應(yīng)激的常見(jiàn)危險(xiǎn)信號(hào)。本實(shí)驗(yàn)主要研究細(xì)胞外酸化對(duì)BMDCs分泌IL-1β的影響以及ASICs介導(dǎo)其分泌的分子機(jī)制。
　　方法：誘導(dǎo)培養(yǎng)骨髓來(lái)源的樹(shù)突狀細(xì)胞BMDCs，成熟后用LPS（100ng/ml）預(yù)處理細(xì)胞12h，進(jìn)行分組刺激。胞外酸化以pH6.5的培養(yǎng)基模擬，刺激4h后收

2、上清，ELISA檢測(cè)IL-1β的分泌；刺激后收細(xì)胞通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)和WB檢測(cè)胞內(nèi)caspase-1的活化情況，以及阻斷其活化后檢測(cè)IL-1β的分泌；運(yùn)用干擾RNA（siRNA）降低ASIC2的表達(dá)后，檢測(cè)酸刺激對(duì)DC分泌IL-1β的影響。
　　結(jié)果：1）胞外酸刺激可以誘導(dǎo)BMDCs分泌有活性的IL-1β。
　　2）酸刺激組與未刺激組相比，活化的caspase-1明顯升高。
　　3）siRNA干擾ASIC2后，酸刺激分泌I