非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)組織和外周血免疫相關(guān)因子的比較分析.pdf

1、目的:
　　研究非小細(xì)胞肺癌患者手術(shù)切除的腫瘤組織、癌旁組織、周圍正常肺組織及術(shù)前外周血中IL-2、IL-6、TGFβ-1、HIF-1α及PD-L1的表達(dá)，分析其相關(guān)性，以進(jìn)一步明確上述免疫指標(biāo)在腫瘤發(fā)生發(fā)展中所起的作用;同時(shí)探索非小細(xì)胞肺癌患者腫瘤免疫微環(huán)境和全身免疫狀態(tài)的變化特點(diǎn)及二者之間的關(guān)系，以驗(yàn)證患者外周血免疫指標(biāo)可作為監(jiān)測(cè)患者免疫功能的變化、評(píng)估患者治療療效及預(yù)后依據(jù)的可靠性，并期為今后有關(guān)腫瘤與免疫的研究搭建橋梁，通

2、過(guò)驗(yàn)證外周血與腫瘤微環(huán)境免疫狀態(tài)的相關(guān)性，以克服因腫瘤組織難獲得而致相關(guān)研究難以開(kāi)展進(jìn)行這一弊端，以達(dá)到簡(jiǎn)化研究步驟，節(jié)省研究成本的目的。
　　方法:
　　納入2013年11月-2014年4月之間在中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院胸外科行手術(shù)治療的非小細(xì)胞肺癌患者，該部分患者術(shù)后病理均明確為肺腺癌、肺鱗癌或腺鱗癌，且術(shù)前均未行放、化療。收集其手術(shù)切除的病理標(biāo)本，包括腫瘤組織、癌旁肺組織及周圍正常肺組織，用免疫組化方法，檢測(cè)其各組織中免疫

3、相關(guān)因子IL-2、IL-6、TGFβ-1、HIF-1α及PD-L1的表達(dá)水平及分布情況;同時(shí)收集該部分患者術(shù)前外周靜脈血，用ELISA法檢測(cè)其外周血中以上細(xì)胞因子的表達(dá)，并對(duì)該5種細(xì)胞因子在外周血與組織中的表達(dá)相關(guān)性進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，尋找二者的內(nèi)在關(guān)系及規(guī)律。
　　結(jié)果:
　　所納入的肺癌患者各組織免疫組化染色結(jié)果提示:腫瘤組織中TGF-β1和IL-6的表達(dá)明顯高于癌旁和正常肺組織(P＜0.01)，癌旁組織中TGF-β1和IL-

4、6的表達(dá)和正常組織相比無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);腫瘤組織中IL-2的表達(dá)高于癌旁和正常肺組織(P＜0.01)，癌旁組織中IL-2的表達(dá)低于正常肺組織(P＜0.05);而PD-L1的表達(dá)在腫瘤、癌旁和正常組織間均無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。對(duì)不同臨床病理特征的亞組患者進(jìn)行了免疫組化結(jié)果的差異性分析后提示:肺癌組織中，女性患者PD-L1的陽(yáng)性表達(dá)率高于男性患者(P=0.019);TNM分期為Ⅲ期的患者IL-6的陽(yáng)性表達(dá)率高于Ⅰ

5、期和Ⅱ期的患者(P=0.040)，且在PD-L1和TGF-β1兩個(gè)指標(biāo)中，雖最終結(jié)果未得出有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但其TNM分期為Ⅲ期的患者陽(yáng)性表達(dá)率也均明顯高于Ⅰ期和Ⅱ期的患者;且在IL-6、PD-L1和TGF-β1這三個(gè)指標(biāo)中，N2期的患者陽(yáng)性率均明顯高于N1期和N0期。癌旁組織中，T分期為T1的患者IL-2的陽(yáng)性表達(dá)率高于T2及T3+T4的患者(P=0.048)。正常肺組織中，吸煙患者TGF-β1的陽(yáng)性表達(dá)率高于不吸煙的患者(P=0.023

6、)。對(duì)腫瘤、癌旁和正常肺組織各免疫指標(biāo)的表達(dá)進(jìn)行相關(guān)性分析后發(fā)現(xiàn)，癌旁和正常組織IL-2的表達(dá)存在正相關(guān)(R=0.443，P=0.014);腫瘤組織PD-L1的表達(dá)與腫瘤組織IL-2、IL-6及TGF-β1的表達(dá)存在正相關(guān)（R值分別為0.517、0.501和0.408，P值分別為0.003、0.005和0.025）。
　　在對(duì)不同臨床特征的亞組患者外周血的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行差異性分析后發(fā)現(xiàn):吸煙的患者外周血IL-6、PD-L1及TGF-

7、β1的水平均高于不吸煙的患者（P值分別為0.041、0.022和0.004）;腺癌患者外周血PD-L1及TGF-β1的水平高于鱗癌的患者（P值分別為0.029和0.043）;TNM分期為Ⅲ期的患者外周血IL-6、PD-L1及TGF-β1的水平高于Ⅱ期和Ⅰ期的患者（P值分別為0.027、0.042和0.003）。
　　腫瘤、癌旁及正常肺組織各免疫指標(biāo)的免疫組化結(jié)果與外周血檢測(cè)結(jié)果之間的相關(guān)性分析提示:外周血IL-6和PD-L1的水平

8、分別與腫瘤組織中IL-6和PD-L1的表達(dá)存在正相關(guān)（相關(guān)系數(shù)分別為0.451和0.444，P值分別為0.012和0.014），外周血IL-6與腫瘤組織中PD-L1的表達(dá)也存在正相關(guān)（相關(guān)系數(shù)為0.433，P值為0.017），余指標(biāo)未見(jiàn)明顯相關(guān)性。
　　結(jié)論:
　　腫瘤組織中TGF-β1和IL-6的表達(dá)明顯高于癌旁和正常組織，提示NSCLC患者腫瘤及間質(zhì)細(xì)胞可通過(guò)高表達(dá)這兩種免疫抑制因子以造成腫瘤免疫微環(huán)境的免疫抑制狀態(tài)。I

9、L-6、PD-L1和TGF-β1這三種負(fù)性免疫因子的表達(dá)與腫瘤的臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。吸煙可刺激IL-6、PD-L1和TGF-β的高表達(dá)。腫瘤組織PD-L1的表達(dá)與腫瘤組織IL-2、IL-6及TGF-β1的表達(dá)存在正相關(guān)，提示PD-L1在腫瘤免疫微環(huán)境中起著十分重要的作用。外周血IL-6和PD-L1的水平分別與腫瘤組織中IL-6和PD-L1的表達(dá)存在正相關(guān)，提示外周血IL-6和PD-L1的水平可以反映腫瘤組織免疫微環(huán)境中IL-6和P