葛根美白活性物質的分離提取及在化妝品中的應用.pdf

1、本課題主要對中草藥葛根中含有的對皮膚具有美白活性的物質進行了研究，包括葛根有效成分的提取，提取工藝的優(yōu)化，和對美白活性成分進行分離純化，并進一步探討了葛根提取物對酪氨酸酶抑制作用的類型和機理，最后對葛根提取物作了一些應用研究。 對葛根，金銀花，六月雪和柿葉四種常用中草藥分別通過水和乙醇回流提取、濃縮、低溫烘干。采用生化酶法測定各提取物的美白活性。分別測定它們的水提取物和乙醇提取物的美白活性，得到葛根的水提物和乙醇提取物對酪氨酸酶

2、的抑制作用強于其它幾種中草藥的提取物。采用單因素實驗法，考察了緩沖溶液的pH值、L-酪氨酸的量、酪氨酸酶的量、恒溫時間和反應時間這五個因素對美白功效實驗體系的影響，得到最佳實驗條件是：pH值為6.85、L-酪氨酸溶液的量為1.0mL、酪氨酸酶的量為0.40mL、恒溫時間為10min、反應時間為5min。 采用三因素四水平正交試驗法對葛根乙醇提物的提取條件進行優(yōu)化，得到最佳工藝條件為：乙醇濃度為75％、回流時間4h、料液比1:8、

3、提取次數(shù)2次。并繪制了葛根素標準品的標準曲線，測定了正交實驗中9次實驗得到的葛根提取物的黃酮含量。 將葛根的乙醇提取物通過不同極性的溶劑萃取，濃縮后得粗提物，對各粗提物進行酪氨酸酶抑制率的測定，得到葛根的乙酸乙酯萃取物對酪氨酸酶的抑制作用最強。然后用常壓硅膠柱層析法對該萃取物作梯度洗脫，用硅膠G薄板進行TLC檢測，跟蹤洗脫情況，得到A～J共10個洗脫物，再分別對這些洗脫物進行酪氨酸酶抑制率的測定。從測定結果得到，從葛根中分離得到

4、兩個組分B和D對酪氨酸酶的抑制率較高，分別為65.7％和79.2％。對B進行第二次柱層析，得到了對酪氨酸酶抑制作用明顯的B3，它對酪氨酸酶的抑制率為92.3％。對D組分進行第二次柱層析后，得到對酪氨酸酶抑制作用最強的是D4，它對酪氨酸酶的抑制率達98.5％。 對B3和D4進行高效液相色譜、紫外色譜，液質聯(lián)用色譜檢測，并與標準品對比，推斷大豆苷元和葛根素分別為中草藥葛根中的主要美白成分。 研究葛根提取物抑制酪氨酸酶活性的動