葛根美白活性物質(zhì)的分離提取及在化妝品中的應(yīng)用.pdf

1、本課題主要對(duì)中草藥葛根中含有的對(duì)皮膚具有美白活性的物質(zhì)進(jìn)行了研究，包括葛根有效成分的提取，提取工藝的優(yōu)化，和對(duì)美白活性成分進(jìn)行分離純化，并進(jìn)一步探討了葛根提取物對(duì)酪氨酸酶抑制作用的類型和機(jī)理，最后對(duì)葛根提取物作了一些應(yīng)用研究。 對(duì)葛根，金銀花，六月雪和柿葉四種常用中草藥分別通過(guò)水和乙醇回流提取、濃縮、低溫烘干。采用生化酶法測(cè)定各提取物的美白活性。分別測(cè)定它們的水提取物和乙醇提取物的美白活性，得到葛根的水提物和乙醇提取物對(duì)酪氨酸酶

2、的抑制作用強(qiáng)于其它幾種中草藥的提取物。采用單因素實(shí)驗(yàn)法，考察了緩沖溶液的pH值、L-酪氨酸的量、酪氨酸酶的量、恒溫時(shí)間和反應(yīng)時(shí)間這五個(gè)因素對(duì)美白功效實(shí)驗(yàn)體系的影響，得到最佳實(shí)驗(yàn)條件是：pH值為6.85、L-酪氨酸溶液的量為1.0mL、酪氨酸酶的量為0.40mL、恒溫時(shí)間為10min、反應(yīng)時(shí)間為5min。 采用三因素四水平正交試驗(yàn)法對(duì)葛根乙醇提物的提取條件進(jìn)行優(yōu)化，得到最佳工藝條件為：乙醇濃度為75％、回流時(shí)間4h、料液比1:8、

3、提取次數(shù)2次。并繪制了葛根素標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)準(zhǔn)曲線，測(cè)定了正交實(shí)驗(yàn)中9次實(shí)驗(yàn)得到的葛根提取物的黃酮含量。 將葛根的乙醇提取物通過(guò)不同極性的溶劑萃取，濃縮后得粗提物，對(duì)各粗提物進(jìn)行酪氨酸酶抑制率的測(cè)定，得到葛根的乙酸乙酯萃取物對(duì)酪氨酸酶的抑制作用最強(qiáng)。然后用常壓硅膠柱層析法對(duì)該萃取物作梯度洗脫，用硅膠G薄板進(jìn)行TLC檢測(cè)，跟蹤洗脫情況，得到A～J共10個(gè)洗脫物，再分別對(duì)這些洗脫物進(jìn)行酪氨酸酶抑制率的測(cè)定。從測(cè)定結(jié)果得到，從葛根中分離得到

4、兩個(gè)組分B和D對(duì)酪氨酸酶的抑制率較高，分別為65.7％和79.2％。對(duì)B進(jìn)行第二次柱層析，得到了對(duì)酪氨酸酶抑制作用明顯的B3，它對(duì)酪氨酸酶的抑制率為92.3％。對(duì)D組分進(jìn)行第二次柱層析后，得到對(duì)酪氨酸酶抑制作用最強(qiáng)的是D4，它對(duì)酪氨酸酶的抑制率達(dá)98.5％。 對(duì)B3和D4進(jìn)行高效液相色譜、紫外色譜，液質(zhì)聯(lián)用色譜檢測(cè)，并與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比，推斷大豆苷元和葛根素分別為中草藥葛根中的主要美白成分。 研究葛根提取物抑制酪氨酸酶活性的動(dòng)