茶渣提取蛋白及飼料化利用的初步研究.pdf

1、本研究主要分為兩個部分：以茶渣為原料，采用稀堿提取法提取荼渣蛋白質(zhì)，通過試驗，確定了提取蛋白質(zhì)的最佳條件，并對茶渣蛋白質(zhì)的沉淀和脫色兩個純化環(huán)節(jié)做了初步研究，確定了最佳沉淀和脫色條件；以茶渣為原料，利用微生物發(fā)酵技術(shù)進行固體發(fā)酵，生產(chǎn)微生物蛋白質(zhì)飼料的研究，通過試驗，確定了最佳發(fā)酵條件。主要研究內(nèi)容與結(jié)果如下：
　　 ⑴采用稀堿提取方法提取荼渣蛋白質(zhì)，通過單因素實驗和正交優(yōu)化試驗，確定了茶渣蛋白質(zhì)的最佳提取條件為：pH12、提取

2、溫度70℃、液固比50:1，提取時間60min，經(jīng)提取2次后，茶渣蛋白質(zhì)提取液中的蛋白質(zhì)平均提取率為29.71％.并對茶渣蛋白質(zhì)提取液進行沉淀和脫色的初步純化研究。選擇等電點沉淀法，硫酸銨鹽析法和IE-硫酸銨鹽析混合沉淀法沉淀茶渣蛋白質(zhì)，通過試驗，三種不同沉淀法對茶渣蛋白質(zhì)的析出率分別為：等電點法的析出率為37.05％、硫酸銨鹽析法的析出率為82.88％、等電點-硫酸銨鹽析復(fù)合沉淀法的析出率為89.70％，確定等電點-硫酸銨鹽析復(fù)合沉淀

3、法為茶渣蛋白質(zhì)的最佳沉淀方法，沉淀條件為：pH值為5、80％硫酸銨濃度的條件下沉淀。并選擇顆?；钚蕴?、粉末活性碳、硅藻土、丙酮為脫色劑，對沉淀后的茶渣粗蛋白進行脫色研究，通過單因素實驗和正交試驗，確定了茶渣蛋白質(zhì)最佳脫色條件為：粉末活性炭用量為1.5％、脫色溫度50℃、脫色時間60min，最終得到黃灰色蛋白質(zhì)產(chǎn)品，其中蛋白質(zhì)含量為88.53％。
　　 ⑵采用微生物固體發(fā)酵技術(shù)對茶渣進行發(fā)酵生產(chǎn)蛋白質(zhì)飼料的研究。選擇尿素、硫酸銨、

4、硝酸鉀三種無機氮為茶渣培養(yǎng)基的無機氮源，通過實驗對比，選擇尿素作為茶渣培養(yǎng)基中的無機氮源，且添加量在2％時，發(fā)酵效果最佳。通過對黑曲霉單菌種發(fā)酵、酵母菌單菌種發(fā)酵、混合菌種發(fā)酵三種不同發(fā)酵方法的對比，發(fā)酵條件均為：10％的接種量接種到20g培養(yǎng)基中，加入40％水分，溫度29℃、尿素添加量2％條件下發(fā)酵5d，結(jié)果表明，混合菌種發(fā)酵效果優(yōu)于任何單一菌種的發(fā)酵效果，所以選擇混合菌種發(fā)酵為最佳發(fā)酵方式，并確定混合菌種的配比比例為1:3(黑曲霉：

5、酵母菌，v/v)，在此條件下，發(fā)酵效果最佳.對影響混合菌種發(fā)酵效果的的四個主要因素：接種量、發(fā)酵溫度、水分含量、發(fā)酵時間進行單因素試驗和正交優(yōu)化試驗，最后確定混合菌種最佳發(fā)酵條件為：混合菌種配比比例為1:3(黑曲霉：酵母菌，v/v)、接種量12％，尿素添加量2％、溫度28℃、水分40％、發(fā)酵7天時間，發(fā)酵產(chǎn)物中蛋白質(zhì)含量最高能達到29.84％，比空白對照中18.56％的蛋白質(zhì)含量高出11.28％，發(fā)酵產(chǎn)物中蛋白質(zhì)含量比未經(jīng)過發(fā)酵的茶渣蛋