紅曲色素提取及其黃色組分制備與檢測(cè)技術(shù)研究.pdf

1、紅曲色素(Monascus pigments)是紅曲菌發(fā)酵生產(chǎn)的天然色素，為紅、黃色調(diào)的多種單一色素的混合物，有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和生物活性，尤其在肉品中代替硝酸鹽類(lèi)的應(yīng)用研究日益受到關(guān)注。我國(guó)市場(chǎng)銷(xiāo)售和使用的紅曲色素產(chǎn)品品種比較單一，化學(xué)成分不明確，質(zhì)量規(guī)格資料較為貧乏，質(zhì)量不穩(wěn)定，既給生產(chǎn)使用帶來(lái)了安全隱患，又限制了我國(guó)的相關(guān)產(chǎn)品進(jìn)入國(guó)際市場(chǎng)。 本研究以紅曲米粉為試驗(yàn)材料，通過(guò)對(duì)超聲波輔助提取紅曲色素的研究，確立了各工藝參數(shù)對(duì)紅

2、色組分提取效果及色調(diào)的影響，然后采用制備型液相色譜同時(shí)分離制備了紅曲色素中紅曲素和安卡紅曲黃素純品，并對(duì)制備收集的兩種色素純品進(jìn)行了純度分析和結(jié)構(gòu)鑒定，以制備的兩種色素純品為標(biāo)準(zhǔn)品，研究建立了同時(shí)測(cè)定紅曲混合色素中的紅曲素和安卡紅曲黃素的高效液相色譜法方法，并對(duì)國(guó)內(nèi)部分企業(yè)的紅曲米粉和紅曲紅色素產(chǎn)品進(jìn)行了檢測(cè)。 主要試驗(yàn)結(jié)果如下： 　　1、超聲波提取法具有條件溫和、提出率高、速度快等優(yōu)點(diǎn)，其獨(dú)特的機(jī)械振動(dòng)作用和空化作用可

3、達(dá)到強(qiáng)化提取、提高效率的效果。以60％的乙醇溶液作為紅曲色素的提取溶劑，探討了不同頻率、功率的超聲波對(duì)色素中不同組分提取效果的影響，結(jié)果顯示各因素對(duì)紅色組分提取效果的影響程度依次為：頻率>時(shí)間>功率>液料比，對(duì)色調(diào)的影響程度依次為：液料比>頻率>時(shí)間>功率，綜合考慮超聲波對(duì)紅色組分提取效果和色調(diào)兩個(gè)指標(biāo)的影響，確定紅曲色素超聲波輔助提取的最優(yōu)條件為45KHz、28KHz雙頻交替3min，功率120W，液料比1.5:1，時(shí)間30min。

4、 2、研究了同時(shí)分離制備紅曲色素中紅曲素和安卡紅曲黃素純品的制備液相色譜法。確定了其最佳條件為C18反相制備色譜柱，流動(dòng)相甲醇：水(V：V=80:20)，檢測(cè)波長(zhǎng)233nm，流速：50mL/min，進(jìn)樣量1mL。該法所得產(chǎn)品用分析型HPLC檢測(cè)，歸一化法定量，質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為96.761％、99.234％，經(jīng)紫外可見(jiàn)光譜和二級(jí)質(zhì)譜分析，確定其分子量及分子結(jié)構(gòu)，可推斷為紅曲素和安卡紅曲黃素。本方法操作簡(jiǎn)便，產(chǎn)品純度高，紅曲素和安卡紅曲

5、黃素純品可用做分析檢測(cè)方法的對(duì)照品。 3、研究建立了用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定紅曲混合色素中的紅曲素和安卡紅曲黃素的方法。正己烷回流提取紅曲米粉中的黃色素組分，再經(jīng)高效液相色譜儀分離檢測(cè)，采用SHIM-PACK HRC-ODS C18色譜柱，甲醇-水溶液(V：V=80:20)為流動(dòng)相，流速1.0mL/min，在波長(zhǎng)394nm下測(cè)定，以自制的紅曲素和安卡紅曲黃素對(duì)照品進(jìn)行定性定量分析。該方法在10～500mg/L范圍內(nèi)呈良好的線(xiàn)性關(guān)