一種新型抗真菌抗生素發(fā)酵工藝的研究.pdf

1、近年來，深部真菌感染率逐漸提高，對患者的健康和生命造成了很大的威脅。課題組篩選得到一株芽孢桿菌，能產(chǎn)生大環(huán)內(nèi)酯類抗真菌抗生素，對引起深部真菌感染的白色念珠菌具有很好的抑制作用。
　　該芽孢桿菌經(jīng)16S rRNA序列測定和NCBI數(shù)據(jù)庫BLAST搜索，確定其與B.subtilisstrain AU53的16S rRNA序列同源性為98％，鑒定為一株芽孢桿菌。
　　本論文首先采用單因素法對該抗生素的搖瓶培養(yǎng)工藝進(jìn)行優(yōu)化，確定最佳

2、發(fā)酵培養(yǎng)基組成(g/100mL):可溶性淀粉濃度4％，黃豆餅粉0.825％，(NH4)2SO41.375％，K2HPO40.24％，NaC10.2％, MgSO40.05％, CaCO30.072％, CuSO40.002％, FeSO40.002％, MnSO40.002％;最佳發(fā)酵條件:pH6.5，接種量8％，轉(zhuǎn)速200 rpm，裝液量40 mL/250 mL，28℃下?lián)u瓶發(fā)酵36h產(chǎn)抗水平達(dá)到6364.343U/mL，效價提高了8

3、.37倍。
　　采用響應(yīng)面法優(yōu)化該抗生素的搖瓶培養(yǎng)條件，通過Plackett-Burman試驗發(fā)現(xiàn)影響產(chǎn)物生成量的3個主要因素:黃豆餅粉、可溶性淀粉和(NH4)2SO4。采用最陡爬坡試驗和Box-Behnken試驗設(shè)計得到響應(yīng)面優(yōu)化(RSM)后的最佳培養(yǎng)基組成(g/L):黃豆餅粉2.77，可溶性淀粉27.2，(NH4)2SO43.73，其余同單因素優(yōu)化后條件。采用上述優(yōu)化后的培養(yǎng)基，抗生素效價由最初的6364.343U/mL提高到