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文檔簡(jiǎn)介
1、魚類遠(yuǎn)緣雜交是指親緣關(guān)系在種或種以上的兩種魚類之間的雜交,其能有效的整合雙親的優(yōu)點(diǎn),可能使雜交后代在外形、生長(zhǎng)速度、存活率以及抗病能力等方面表現(xiàn)出雜種優(yōu)勢(shì),因此遠(yuǎn)緣雜交是一種重要的魚類遺傳育種和性狀改良方法。另外,遠(yuǎn)緣雜交也已被證明是形成多倍體的一種重要方式。本研究在通過(guò)將雌性黃尾密鲴(2n=48)和雄性翹嘴紅鲌(2n=48)進(jìn)行亞科間遠(yuǎn)緣雜交,成功獲得鲴鲌雜交F1代的基礎(chǔ)上,對(duì)雜交后代的DNA含量、染色體數(shù)目、外形特征、5SrDNA的
2、結(jié)構(gòu)組成與變異及染色體定位、Sox基因等生物學(xué)特征進(jìn)行了系統(tǒng)研究,主要研究?jī)?nèi)容如下:
1)通過(guò)雌性黃尾密鲴與雄性翹嘴紅鲌遠(yuǎn)緣雜交獲得了鲴鲌雜交F1代。利用流式細(xì)胞儀測(cè)定法和外周血細(xì)胞培養(yǎng)的染色體倍性檢測(cè)方法對(duì)鲴鲌F(tuán)1的倍性進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果表明鲴鲌F(tuán)1為二倍體(2n=48)。對(duì)兩年齡的二倍體鲴鲌的可數(shù)性狀進(jìn)行了系統(tǒng)分析,結(jié)果表明其部分性狀偏向于父本或者母本,也有居于父母本之間的,體現(xiàn)出雜交特性,還有較父母本高的。性腺石蠟切片表明雌
3、性二倍體鲴鲌具有正常發(fā)育的卵巢。
2)對(duì)二倍體鲴鲌及其親本的5SrDNA進(jìn)行了克隆及測(cè)序分析和染色體定位。發(fā)現(xiàn)在黃尾密鲴中含有兩種大小分別為188bp和221bp的5SrDNA結(jié)構(gòu)單元,分別命名為結(jié)構(gòu)單元Ⅰ和結(jié)構(gòu)單元Ⅱ;翹嘴紅鲌中除單元Ⅰ外,還有結(jié)構(gòu)單元Ⅲ(286bp);二倍體鲴鲌除遺傳獲得結(jié)構(gòu)單元Ⅰ和結(jié)構(gòu)單元Ⅲ外,還衍生出結(jié)構(gòu)單元Ⅳ(212bp),但并未觀察到結(jié)構(gòu)單元Ⅱ。5SrDNA-188bp探針熒光原位雜交實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),在鲴
4、鲌及其親本染色體中期分裂相中明顯可見四個(gè)信號(hào),兩個(gè)位于一對(duì)最大的亞中部著絲粒染色體上,另一對(duì)位于一對(duì)亞端部著絲粒染色體上。這些結(jié)果表明鲴鲌雜交后代在遺傳了親本大部分5SrDNA結(jié)構(gòu)單元的同時(shí),也發(fā)生了5SrDNA結(jié)構(gòu)單元變異。
3)參照Sox基因保守的HMG框序列,設(shè)計(jì)合成一對(duì)簡(jiǎn)并引物對(duì)雜交后代及其親本的全基因組DNA進(jìn)行了PCR擴(kuò)增和測(cè)序分析,并將二倍體鲴鲌與其親本Sox基因進(jìn)行了比較分析。發(fā)現(xiàn)黃尾密鲴中有三個(gè)Sox片段,S
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