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文檔簡介
1、該文一方面從基因工程假單孢桿菌(Pseudomonas putida)發(fā)酵微環(huán)境入手,研究了培養(yǎng)基組成和培養(yǎng)條件對菌體生長和干擾素生產(chǎn)的影響.另一方面也對干擾素進行PEG修飾、劑型改變、藥物釋放控制進行了研究.以模糊理論為基礎(chǔ),提出了生長生產(chǎn)耦合度概念,定量表征生長和生產(chǎn)的同步程度.采用30℃-20℃的兩階段培養(yǎng),并采用歷時一小時緩慢降溫實現(xiàn)生長生產(chǎn)階段轉(zhuǎn)換,干擾素產(chǎn)量提高2倍.確定了兩階段培養(yǎng)模式及其培養(yǎng)條件.通過生長階段培養(yǎng),將5升
2、發(fā)酵罐中菌體密度提高了2-3倍;通過生產(chǎn)階段培養(yǎng),將干擾素含量提高了1-2倍.以平均分子量為5000的單甲氧基聚乙二醇(mPEG)為原料,以?;噭┓ɑ罨痬PEG,對干擾素α-2b進行分子修飾.采用模仿生物體液環(huán)境的仿生學(xué)思路制成穩(wěn)定的干擾素液體制劑,以羥乙基淀粉-40、檸檬酸緩沖液等成分穩(wěn)定干擾素,制劑中未使用人血白蛋白、防腐劑成分,無需惰性氣體保護.以聚乳酸乙醇酸為材料將干擾素α-2b包裹成微囊,具有規(guī)整幾何表態(tài),平均粒徑為2.33
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