生物被膜引起食品生物危害的研究——食源性病原菌生物被膜在不銹鋼表面的形成過(guò)程及其對(duì)殺菌劑的敏感性.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)研究食源性病原菌(金黃色葡萄球菌,沙門(mén)氏菌)生物被膜在不銹鋼表面形成過(guò)程及其對(duì)常見(jiàn)消毒劑(次氯酸鈉,二氧化氯)的敏感性,為在食品加工過(guò)程中對(duì)加工設(shè)備的不銹鋼表面清洗消毒提供了試驗(yàn)數(shù)據(jù),并為食品加工中對(duì)其他表面的清洗消毒提供參考.通過(guò)建立食源性病原菌(金黃色葡萄球菌和沙門(mén)氏菌)生物被膜模型,測(cè)定它們?cè)诓讳P鋼表面形成生物被膜的生長(zhǎng)曲線(xiàn),同時(shí)結(jié)合金黃色葡萄球菌和沙門(mén)氏菌的生長(zhǎng)曲線(xiàn),分析食源性病原菌生物被膜在不銹鋼表面的形成過(guò)程;采用掃描

2、電鏡(scanning electron microscope,SEM)確認(rèn)生物被膜形態(tài)并采用計(jì)算機(jī)圖形處理系統(tǒng)進(jìn)行圖形分析;采用平板擦拭法(plating ofswabbing)測(cè)定生物被膜中存活細(xì)菌數(shù);采用試管稀釋法測(cè)定常見(jiàn)殺菌劑對(duì)生物被膜及其菌懸液的最低清除濃度.金黃色葡萄球菌和沙門(mén)氏菌分別在大豆胰酶肉湯(Trypease soy broth,TSB)中與不銹鋼片共同培養(yǎng)7d后可形成穩(wěn)定的生物被膜,細(xì)菌密度約達(dá)到10<'6>cfu

3、/cm<'2>.用掃描電鏡可見(jiàn)金黃色葡萄球菌生物被膜細(xì)菌呈球狀,沙門(mén)氏菌生物被膜細(xì)菌呈桿狀,周?chē)植及纪共黄降膲K狀物,菌體周?chē)拖嗷ラg以粘稠的粘液絲相連,借助于粘液樣物使細(xì)菌之間相互連接形成生物被膜.有效氯濃度、TSB培養(yǎng)基濃度、作用時(shí)間均能影響殺菌劑的殺菌效果.當(dāng)不含TSB培養(yǎng)基時(shí),消毒劑(次氯酸鈉和二氧化氯)有效氯濃度50~100mg/l作用時(shí)間超過(guò)20min,可使10<'6> cfu/ml的菌懸液殺菌率達(dá)到100﹪,次氯酸鈉和二氧

4、化氯有效氯濃度100~150 mg/l作用時(shí)間超過(guò)20min,可使細(xì)菌密度為10<'6>cfu/cm<'2>的生物被膜殺菌率達(dá)到100﹪.當(dāng)在3.0﹪(w/v)TSB中,次氯酸鈉和二氧化氯有效氯濃度大于150mg/l作用30min后,可使10<'6>cfu/ml的菌懸液殺菌率達(dá)到100﹪,而在有效氯濃度超過(guò)400mg/l作用30min后,才使細(xì)菌密度為10<'6>cfu/cm<'2>的生物被膜殺菌率達(dá)到100﹪.實(shí)驗(yàn)中,二氧化氯對(duì)菌懸液