短梗霉多糖菌的誘變篩選和發(fā)酵工藝.pdf

1、普魯蘭多糖是由出芽短梗霉發(fā)酵生成的一種胞外葡聚糖，因其安全無毒、可食用、熱值低、可塑、成膜性好、所成膜氧氮透過率極低，故被廣泛用于食品保鮮、包裝袋、添加劑、醫(yī)藥、農(nóng)藥、污水處理等眾多領(lǐng)域，具有極大的開發(fā)前景和價值。
　　 本文在如下幾個方面對短梗霉菌的形態(tài)變化、物理化學(xué)誘變方法、誘變菌的篩選和培養(yǎng)基的優(yōu)化、發(fā)酵罐擴(kuò)大培養(yǎng)工藝等進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究，研究結(jié)果具有一定應(yīng)用價值。
　　 1、通過顯微觀察和顯微攝影掌握了短梗霉菌在不同

2、的培養(yǎng)條件下細(xì)胞生長和形態(tài)變化的基本規(guī)律。
　　 2、通過60Coγ射線照射、紫外及亞硝酸誘變，研究了該菌對這三種誘變方式的敏感性，分別得到三種誘變方式的致死曲線；
　　 經(jīng)逐級誘變，獲得三株各有特點(diǎn)較為優(yōu)良的菌株：不產(chǎn)色素的27[＃]菌、多糖產(chǎn)量較高的3[＃]菌、在發(fā)酵后期細(xì)胞和色素可以自然凝聚沉降的3[＃]-1菌。
　　 3、對這三株菌分別進(jìn)行培養(yǎng)基的優(yōu)化搖瓶發(fā)酵，采用正交試驗(yàn)的方法，以葡萄糖和硫酸銨為基本碳

3、源和氮源，逐級正交優(yōu)化轉(zhuǎn)換到以蔗糖和豆餅粉為碳源和氮源，優(yōu)化結(jié)果：其中3[＃]菌發(fā)酵多糖達(dá)到最高產(chǎn)量42.33g/L，糖轉(zhuǎn)化率達(dá)52.9[％]。
　　 4、對3[＃]菌和3[＃]-1菌分別進(jìn)行10升發(fā)酵罐擴(kuò)大試驗(yàn)，進(jìn)一步深入的了解發(fā)酵過程中各參數(shù)如pH、溶氧、碳源的消耗、菌體生長變化的規(guī)律。3[＃]菌在72小時即達(dá)到最高多糖產(chǎn)量29.7g/L，糖轉(zhuǎn)化率55[％]。
　　 5、對27[＃]菌和3[＃]-1菌的研究表明，27

4、[＃]菌能長期維持酵母細(xì)胞形態(tài)，培養(yǎng)過程極少有色素分泌到發(fā)酵液中，但其多糖產(chǎn)量較低；3[＃]-1菌在發(fā)酵后期細(xì)胞和色素自然凝聚沉降，很容易與發(fā)酵液分離，對多糖的后續(xù)提取極為有利，發(fā)酵罐擴(kuò)大培養(yǎng)的多糖產(chǎn)量略低于3[＃]菌，但其發(fā)酵周期過長，延續(xù)到5天以上。圍繞著幾株突變菌的特點(diǎn)還要做更深入的改良和優(yōu)化工作。
　　 6、培養(yǎng)基優(yōu)化過程發(fā)現(xiàn)氧休克對細(xì)胞生長和多糖的產(chǎn)量有較大影響，氧休克可能是維持了細(xì)胞的某種形態(tài)，導(dǎo)致多糖產(chǎn)量增加。氧休