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文檔簡(jiǎn)介
1、我國(guó)豐富的鹽田、鹽湖、鹽井等高鹽資源環(huán)境中,蘊(yùn)藏著多樣性的嗜鹽古菌物種,這些物種是嗜鹽古菌分類學(xué)以及嗜鹽古菌應(yīng)用研究的珍貴資源。我國(guó)嗜鹽古菌資源的研究已開始30余年,取得了豐碩的成果,然而相對(duì)于數(shù)量龐大的鹽資源環(huán)境而言,嗜鹽古菌資源和利用的研究還有很大的拓展空間。本文主要研究?jī)?nèi)容為:研究江蘇省連云港市臺(tái)南和臺(tái)北鹽田中可培養(yǎng)嗜鹽古菌的多樣性,篩選產(chǎn)胞外蛋白酶的菌種用于魚露發(fā)酵,鑒定發(fā)酵菌種的安全性,優(yōu)化菌種的培養(yǎng)條件。
從臺(tái)
2、南鹽田和臺(tái)北鹽田分別分離到65株和58株菌嗜鹽古菌?;?6SrRNA基因序列分析與系統(tǒng)發(fā)育分析結(jié)果表明,臺(tái)南鹽田的65株嗜鹽古菌分屬10個(gè)屬的19個(gè)分類單元,其優(yōu)勢(shì)類群為Halorubrum類群和Halogranum類群,臺(tái)北鹽田的58株嗜鹽古菌分屬9個(gè)屬的15個(gè)分類單元,其優(yōu)勢(shì)類群為Halobacterium類群、Halogranum類群。臺(tái)南鹽田有4個(gè)新的分類單元,臺(tái)北鹽田有5個(gè)新的分類單元,這9個(gè)新的分類單元為4個(gè)新屬和5個(gè)新種
3、,分別為Halogranum gelatinilyticum TNN44T、Halogranum amylolyticum TNN58T、Halobellus clavatus TNN18T、Halorientalis regularis TN28T、Halorussus rarus TBN4T、Halolamina pelagica TBN21T、Haloplanus aerogenes TBN37T、Halomicrobium zh
4、ouii TBN51T、Halobellus limi TBN53T。
從分離自臺(tái)南鹽田、臺(tái)北鹽田、港西鹽場(chǎng)的菌株以及相關(guān)模式菌株中篩選速釀魚露的發(fā)酵菌種,分別為TBN4、TBN37、TNN48、RO2-11、GX74、Halomicrobium mukohataei 9738T。以NOM培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基優(yōu)化這6株菌的碳源和氮源。菌株TBN4的碳源為0.1%蔗糖、氮源為0.1%酵母提取物和0.2%魚肉蛋白胨;菌株TBN3
5、7的碳源為0.1%淀粉、氮源為0.1%酵母提取物和0.1%魚肉蛋白胨;菌株TNN48的碳源為0.1%蔗糖、氮源為1.5%酵母提取物和0.3%魚肉蛋白胨;菌株RO2-11的碳源為0.1%乳酸鈉、氮源為0.5%酵母提取物和0.3%魚肉蛋白胨;菌株9738的碳源為0.1%淀粉、氮源為1.1%酵母提取物和0.1%魚肉蛋白胨;菌株GX74的碳源為0.1%蔗糖、氮源為0.3%酵母提取物和0.1%魚肉蛋白胨。
分別用單一和混合菌種在20
6、%鹽濃度下對(duì)不去內(nèi)臟的龍頭魚進(jìn)行速釀魚露的發(fā)酵,混合菌種設(shè)置了25%鹽濃度組和去內(nèi)臟組。氨基酸含量測(cè)定結(jié)果表明,20%鹽濃度下不去內(nèi)臟組,單個(gè)菌種發(fā)酵和混菌發(fā)酵對(duì)魚露發(fā)酵的加速效果不明顯,而20%鹽濃度去內(nèi)臟混合菌種發(fā)酵組的氨基酸含量明顯高于其他組,推測(cè)可能是魚內(nèi)臟中有抑制嗜鹽古菌生長(zhǎng)的物質(zhì)存在。25%鹽濃度未去內(nèi)臟組的氨基酸含量稍高于20%鹽濃度未去內(nèi)臟組,推測(cè)可能是高鹽環(huán)境對(duì)嗜鹽古菌的生長(zhǎng)及酶的活性更有利。因此20%鹽濃度、去內(nèi)臟混
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