珊瑚共附生可培養(yǎng)真菌菌群多樣性及其生物活性研究.pdf

1、本文從廣東徐聞珊瑚礁國家級自然保護區(qū)采集8種珊瑚,用培養(yǎng)法分離純化真菌,應用形態(tài)學觀察與分子鑒定相結合的方法,進行珊瑚共附生真菌菌群多樣性研究,并對分離的真菌菌株進行生物活性篩選。
　　 運用稀釋平板法和基于internal transcribed spacer-rDNA(ITS-rDNA)基因序列的系統(tǒng)發(fā)育分析對珊瑚共附生可培養(yǎng)真菌多樣性進行研究,將所得到的基因序列與NCBI數(shù)據(jù)庫GenBank的序列進行相似性比較并構建系統(tǒng)發(fā)

2、育樹。實驗中從8種珊瑚表面和內(nèi)部共分離得到97株菌落形態(tài)各異的真菌。ITS-rDNA序列分析及形態(tài)學鑒定表明,珊瑚共附生真菌主要包括曲霉菌Aspergillus sp.、枝孢霉菌Cladosporium sp.、炭角菌Xylariales sp.、青霉菌Penicillium sp.、葡萄穗霉菌Stachvbotrys sp.、赤霉菌Gibberella moniliformis、鐮刀霉菌Fusarium sp.等。分離得到的菌株中,4

3、-13與GenBank中已報道的基因序列的相似性僅為89％,可能是潛在的新屬種。
　　 選取04叢生盔形珊瑚(Galaxea fascicularis)共附生可培養(yǎng)真菌進行抑菌活性和酶抑制活性篩選。采用96孔板培養(yǎng)法結合酶標儀測定。以6種常見的致病菌或致食品腐敗的細菌為指示菌,對其共附生真菌次級代謝產(chǎn)物進行抗菌活性篩選,對抗菌能力及抗菌譜進行研究。結果表明:19株真菌均具有不同程度的抗菌活性。高活性菌株占52.63％,其中4-4

4、、4-5兩菌株表現(xiàn)出良好的抗菌活性。在酶抑制性實驗中,有10株真菌對一種或兩種酶具有抑制活性,其中曲霉屬真菌效果良好,散囊屬真菌4-12、枝孢霉4—20對乙酰膽堿酯酶的抑制效果超過了陽性對照石杉堿甲。粗提物樣品對α-葡萄糖苷酶、乙酰膽堿酯酶有較好的抑制活性,說明具有抗老年癡呆、抗高血壓活性。這對新藥的研究開發(fā)提供了一定的理論基礎,具有進一步的研究價值。
　　 結果表明,珊瑚共附生可培養(yǎng)真菌多樣性較為豐富,潛在新的微生物菌種資源,