核桃內(nèi)生真菌多樣性及高活性菌株代謝產(chǎn)物抑菌活性研究.pdf

1、本研究以核桃(Juglans regia L.)的不同部位組織（根、一年生莖、兩年生莖、干莖、葉和果）為材料，采用組織分離法，對(duì)春夏季來自陜西山陽縣、藍(lán)田縣與宜君縣3個(gè)不同生境的材料進(jìn)行內(nèi)生真菌的分離鑒定、種群組成、定殖率、多樣性指數(shù)、高活性菌株抑菌活性等研究。結(jié)果如下:
　　1.從1440個(gè)組織塊中共分離得到1035株內(nèi)生真菌，其中在兩年生莖268株，一年生莖255株，干莖229株，葉131株，根99株，果53株。1035株內(nèi)生

2、真菌經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定和分子鑒定，隸屬于5綱10科10目39屬，在綱的水平上看，半知菌綱(Deuteromycetes)為優(yōu)勢(shì)類群（834株），占菌株總數(shù)的80.58％;在目的水平上看，叢梗孢目(Moniliales)為優(yōu)勢(shì)類群（468株），占菌株總數(shù)的45.22％，其次是無孢菌群(Mycelia Sterilia)和球殼孢目(Sphaeropsidales)，分別占菌株總數(shù)的15.46％和12.95％;在屬的水平上看，三大優(yōu)勢(shì)類群為交鏈孢霉

3、屬（Alternaria）、莖葉核菌屬（Ectostroma）和花核菌屬(Anthina)，分別占菌株總數(shù)的24.44％、10.92％和8.70％。
　　2.從生物多樣性來看，夏季分離到的核桃內(nèi)生真菌要明顯多于春季，分別是643株和392株，多樣性指數(shù)分別為2.02和1.46。不同生境核桃內(nèi)生真菌的分離頻率也存在差異，山陽的分離頻率最高，為42.32％，宜君的次之，為30.82％，藍(lán)田的分離頻率最低，為26.86％。三個(gè)不同生境的

4、多樣性指數(shù)分別為:山陽1.47，藍(lán)田1.07，宜君1.22。核桃不同部位內(nèi)生真菌的類群組成和分離頻率存在一定差異，分離頻率呈現(xiàn)趨勢(shì):兩年生莖＞一年生莖＞干莖＞葉＞根＞果。核桃不同部位內(nèi)生真菌的定殖率:兩年生莖的定殖率最高(77.78％)，其余依次為一年生莖＞干莖＞葉＞根＞果。分離率的變化與定殖率不同，從高到低依次為兩年生莖＞葉＞一年生莖＞干莖＞果＞根。兩年生莖的定殖率和分離率最高，果的定殖率最低。核桃不同部位內(nèi)生真菌的多樣性也存在差異，

5、核桃兩年生莖的多樣性指數(shù)最高，為0.97;果的多樣性指數(shù)最低，為0.25。從相似性來看，無論是不同季節(jié)之間，還是不同生境、不同部位之間，相似性系數(shù)均在0.5000以下，為中等程度不相似。
　　3.高活性菌株篩選顯示，在供試的190株內(nèi)生真菌中，有7.89％對(duì)至少1種病原菌抑制率在75％以上;同時(shí)對(duì)6種植物病原菌抑制率均在55％以上的內(nèi)生真菌占供試菌株總數(shù)的2.63％;就抑制效果而言，對(duì)辣椒疫霉病原菌和蘋果腐爛病原菌的抑制效果稍好，

6、抑制率多數(shù)在55％以上;對(duì)小麥赤霉病原菌的抑制率最差，幾乎沒有拮抗作用。夏季核桃內(nèi)生真菌SYS-3-7對(duì)6種植物病原菌的抑制率均在55％以上，確定該菌株為進(jìn)一步研究的對(duì)象。
　　4.核桃內(nèi)生真菌SYS-3-7發(fā)酵液(80mg/mL)對(duì)核桃炭疽病原菌（Gloeosporiumfructigenum）、蘋果腐爛病原菌（Valsa ceratosperma）、小麥赤霉病原菌（Fusariumgraminearum）和辣椒疫霉病原菌（Ph

7、ytophthora capsici）均有不同程度的抑菌效果，其中對(duì)核桃炭疽病原菌有較強(qiáng)的抑制作用，抑菌率達(dá)74.94％，對(duì)蘋果腐爛病原菌（Valsaceratosperma）、小麥赤霉病原菌（Fusarium graminearum）和辣椒疫霉病原菌（Phytophthora capsici）的抑制率在50％以下。SYS-3-7發(fā)酵產(chǎn)物的2個(gè)萃取相不同濃度處理時(shí)，其對(duì)3種植物病原菌均有一定的抑制作用。在相同濃度下，乙酸乙酯萃取物對(duì)小麥