羅布泊可培養(yǎng)嗜堿細菌多樣性及產(chǎn)酶特性研究.pdf

1、本研究首次對羅布泊地區(qū)的嗜堿細菌進行分離，測定其生理特性，明確群落結(jié)構(gòu)和多樣性，針對重要的功能酶篩選產(chǎn)酶菌株，了解其酶學特性，不僅可以豐富我國嗜堿微生物物種資源庫和基因庫，而且為嗜堿菌資源的開發(fā)利用和逆抗基因的發(fā)掘奠定科學基礎，具有重要的理論和實踐意義。 研究結(jié)果表明，從新疆羅布泊“大耳朵”地區(qū)的湖盆沉積物中分離得到151個嗜(耐)堿細菌菌株，其中專性嗜堿菌、兼性嗜堿菌和耐堿菌的比例分別為29.8％，39.7％和30.5％。添

2、加了羅布泊鹽殼浸提物的Horikoshi培養(yǎng)基更有利于嗜堿細菌的富集培養(yǎng)和分離。羅布泊嗜堿細菌對不同堿性物質(zhì)具有不同的選擇適應性。54.3％的嗜堿菌菌株對KOH、K2CO3、NaOH、Na2CO34種堿性物質(zhì)具有廣泛的適應性，13.2％的菌株對Na+有一定的依賴性，對含K+堿性物質(zhì)敏感，只有1.9％的菌株對CO32-堿性物質(zhì)敏感。77.1％嗜堿細菌可以耐受7～15％的NaCl和10～20％的KCl，具有較強的耐鹽特性。 采用1

3、6S-ITSrDNA-RFLP、Rep-PCR、16SrDNA序列測定等分析羅布泊嗜堿細菌群落結(jié)構(gòu)和多樣性，結(jié)果顯示分離嗜堿菌歸屬于6個屬，即芽孢桿菌屬(Bacillus)、動性微菌屬(Planomicrobium)、紅球菌屬(Rhodococcus)、氧化微桿菌屬(Microbacteriumoxydans)、微球菌屬(Micrococcus)、嗜鹽單胞菌屬(Halomonas)，其中優(yōu)勢菌群為Bacillus，次優(yōu)勢菌群為Plano

4、microbium。Bacillus中又包含有6個不同的種(菌株)。優(yōu)勢菌群為Bacillusflexus具有12個不同的亞種或菌株。羅布泊嗜堿細菌的Shannon多樣性指數(shù)為2.024，Margalef豐富度指數(shù)為2.151，具有豐富的多樣性。 羅布泊嗜堿細菌能產(chǎn)生多種胞內(nèi)(外)功能酶。共篩選出海藻糖合成酶產(chǎn)生菌9株，蛋白酶產(chǎn)生菌21株，淀粉酶產(chǎn)生菌10株，脂肪酶產(chǎn)生菌7株，纖維素酶產(chǎn)生菌4株。對篩選出的功能酶菌株所產(chǎn)蛋白酶