菜籽蛋白的反膠束法提取及其酶解研究.pdf

1、菜籽粕是菜籽榨油過程中產生的一種副產物,是經壓榨脫脂后形成的,其粗蛋白含量一般為35～45％,為全價優(yōu)質的植物蛋白,可用作各種,菜籽蛋白的酶解產物還可用于制備功能性多肽。目前,國內在菜籽粕產品方面的開發(fā)程度較低,多用于動物飼料和肥料,造成了資源的浪費。因此對菜籽粕的升值加工是一項重要的應用研究工作。
　　 反膠束萃取是一種新型的生物分子分離技術。應用反膠束法萃取、分離菜籽蛋白,不僅能縮短工藝流程,而且可以避免傳統(tǒng)提取方法使蛋白變

2、性的弊端。
　　 本文主要研究了以雙低菜籽粕為原料,采用超聲波與反膠束相結合的方法,通過前萃、后萃制備、分離菜籽蛋白,并對其進行功能性質比較分析。繼而利用超聲波,得到了具有降血壓特性的菜籽肽。具體研究內容如下:
　　 (1)初步研究了超聲波輔助反膠束法(氣溶膠OT/異辛烷)提取菜籽蛋白。采用田口設計,選取6個影響因素:氣溶膠OT(X1)、pH(X2)、鉀離子濃度(X3)、Wo(X4)、提取時間(X5)和提取溫度(X6),

3、進行實驗。利用SPSS統(tǒng)計軟件分析實驗數據,對二次多項回歸方程求解,獲得最優(yōu)一次擬合多元回歸模型方程(P=0.05)為:Y(菜籽蛋白提取率)=0.063X1+0.017X2+0.024X4+0.529,分析篩選出影響提取工藝的主要因素為:氣溶膠OT、pH、Wo和提取時間,其中前三者為極顯著因素。
　　 (2)探索一種超聲波輔助反膠束法提取蛋白質的改良方法,即先回收異辛烷,然后用少量KCl的緩沖溶液溶解剩余的固形物,添加適量乙醇,

4、最后分離出菜籽蛋白就進入了水相中。再運用均勻設計對各因素的最佳水平范圍進行研究,通過SPSS軟件對回歸方程的分析得到最高后萃率時各因素的水平分別為:酒精2mL,鉀離子濃度1.2mol/L,緩沖液25mL,pH9.5;在此工藝條件下,菜籽蛋白的后萃率為59.56%。
　　 (3)利用超聲波輔助反膠束法(氣溶膠OT/異辛烷)與堿溶酸沉法分別制備得到菜籽分離蛋白,通過測定兩種蛋白質理化和功能性質,比較其差異,得出:超聲波輔助反膠束法制

5、備的菜籽蛋白在蛋白含水量、石油醚浸出物和灰分含量上比較低;其溶解性、起泡性及其穩(wěn)定性、乳化性均優(yōu)于堿溶酸沉法得到的菜籽蛋白,但持水性較差。表明了超聲波輔助反膠束法有助于優(yōu)化了菜籽蛋白功能特性,提高蛋白質量,因此這種新方法在擴展菜籽蛋白在食品加工業(yè)中的應用范圍中將起到重要作用。
　　 (4)以反膠束法萃取得到的菜籽蛋白為原料,以酶解產物的水解度(DH)、三氯乙酸氮溶解指數和肽得率為評價指標,并參照酶解液肽的分子量分布,考察超聲波輔

6、助分步酶解法對蛋白水解的影響。在木瓜蛋白酶、復合蛋白酶、堿性蛋白酶(Alcalase2.4L)、風味蛋白酶(Ravourzyme)、胰蛋白酶組成的6種復合酶中,篩選出制備優(yōu)質小分子量菜籽肽的適宜復合酶。結果表明,木瓜蛋白酶與Ravourzyrne、胰蛋白酶與Ravourzyme組成的兩種復合酶均比較適合酶解此種菜籽蛋白,它們的酶解產物水解度比較高,多肽得率較高,所含小分子量肽也較多。
　　 (5)選取復合酶(胰蛋白酶和Ravou