反膠束萃取牛血清白蛋白的研究.pdf

1、反膠束溶液是由表面活性劑、有機(jī)溶劑、水、有時(shí)添加助表面活性劑組成的熱力學(xué)穩(wěn)定的體系。本文介紹了反膠束體系的性質(zhì)特點(diǎn)及萃取原理，并考察了多種因素對萃取的影響，同時(shí)對反膠束萃取技術(shù)國內(nèi)外研究現(xiàn)狀進(jìn)行了總結(jié)。
　　 本文以十六烷基三甲基氯化銨為表面活性劑，以正辛醇為助表面活性劑，以異辛烷為有機(jī)溶劑制備了熱力學(xué)穩(wěn)定的反膠束體系。并使用該反膠束體系萃取熱穩(wěn)定性良好的牛血清白蛋白。在萃取實(shí)驗(yàn)中，我們考察了接觸時(shí)間、助表面活性劑濃度、表面活性

2、劑濃度、水相pH值、離子強(qiáng)度和種類、溫度等對萃取的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，使用該反膠束體系萃取BSA，4min就能達(dá)到萃取平衡。添加助表面活性劑能增加反膠束體系的穩(wěn)定性，當(dāng)助表面活性劑濃度過高時(shí)，萃取率隨濃度升高而降低。萃取率隨表面活性劑濃度的增加先增大然后略微減??；隨水相pH值的增大而增大；隨離子強(qiáng)度的增大而減小；隨溫度的升高而升高。從熱力學(xué)角度來分析該萃取過程，發(fā)現(xiàn)該過程是熵變控制過程。在最優(yōu)的萃取條件下，使用該反膠束體系萃取BSA，萃

3、取率高達(dá)99.55％。
　　 反萃實(shí)驗(yàn)中，使用了兩種反萃方法：一種是添加短鏈醇反萃法。將適量的無水乙醇加入到反萃液中，從而提高反萃效率。實(shí)驗(yàn)中我們考察了無水乙醇濃度、反萃液鹽濃度、pH值對BSA反萃的影響。在最優(yōu)的反萃條件下，反萃50min達(dá)到平衡，反萃率為85.16％。通過比較萃取前后BSA的圓二譜圖，我們發(fā)現(xiàn)BSA的結(jié)構(gòu)沒有發(fā)生變化，因此使用該反萃方法能極好的保護(hù)蛋白質(zhì)的活性。最后實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)該反膠束體系第二次循環(huán)使用的萃取效